Target nucleic acid sequence amplification

Details Target nucleic acid sequence amplification Target nucleic acid sequence amplification

C - Chemistry, Metallurgy

12

P

C12P 19/34 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2249717

A method is provided for the rapid, substantially isostatic, segregation and amplification of the sequence information of a target nucleic acid sequence positioned within a single- or double-stranded polynucleotide. The method is based on the serial generation of double-stranded DNA engineered to contain terminal nicking sites, nicking of those sites, and extensions from those nicks, thereby displacing any existing polynucleotides. Further provided is a method for detecting polynucleotides using the method of the invention. A kit combining the components commonly used in practicing the method of the invention is also provided.

Cette invention se rapporte à un procédé pour produire la ségrégation et l'amplification rapides et essentiellement isostatiques des informations de séquence d'une séquence d'acides nucléiques cible, située dans un polynucléotide monocaténaire ou dicaténaire. Ce procédé consiste à produire en série des ADN dicaténaires modifiés par génie génétique de façon à contenir des sites de coupure terminaux, à effectuer une coupure au niveau de ces sites et à réaliser des extensions à partir de ces coupures afin de déplacer tous les polynucléotides existants. Cette invention se rapporte en outre à un procédé pour détecter des polynucléotides en utilisant le procédé de cette invention. Un kit combinant les composants couramment utilisés pour réaliser le procédé de cette invention est également présenté.

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