Targeted methods of drug screening using co-culture methods

Details Targeted methods of drug screening using co-culture methods Targeted methods of drug screening using co-culture methods

C - Chemistry, Metallurgy

12

Q

C12Q 1/68 (2006.01) C12N 1/14 (2006.01) C12N 1/20 (2006.01) C12N 5/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)

Patent

CA 2393360

The present invention provides methods of screening for a molecule that inhibits the expression or activity of a protein encoded by a target gene which affects the fitness of a cell. The methods are based on a co-culture assay, and entail culturing together two cell populations, each of which is a population of identical cells, of the same species that differs substantially only in the expression or activity of the gene to be targeted or its encoded protein and the presence or absence of a reporter gene. The screen can be applied to cultured cells, unicellular and multicellular organisms. Manipulating the expression or activity of the target gene sensitizes the host to a molecule which inhibits the target gene or its encoded protein such that the cell or organism comprising the manipulated target gene grows at a different rate from the cell or organism comprising the unmanipulated gene in response to exposure to the molecule. The methods of the invention can be used for identifying drugs, proteins or any other molecules that inhibit the function of proteins encoded by target genes.

L'invention concerne des procédés de criblage d'une molécule qui inhibe l'expression ou l'activité d'une protéine codée par un gène cible qui affecte la santé d'une cellule. Lesdits procédés sont fondés sur un dosage par co-culture comprenant la mise en culture commune de deux populations cellulaires, chacune d'elles étant une population de cellules identiques et de la même espèce qui diffère sensiblement seulement par l'expression ou l'activité du gène à utiliser comme cible ou sa protéine codée et par la présence ou l'absence d'un gène rapporteur. Ledit criblage peut être appliqué à des cellules, des organismes unicellulaires ou multicellulaires de culture. La manipulation de l'expression ou de l'activité du gène cible sensibilise l'hôte envers une molécule qui inhibe le gène cible ou sa protéine codée, de sorte que la cellule ou l'organisme contenant le gène cible manipulé croît à un rythme différent de celui de la cellule ou de l'organisme contenant le gène cible non manipulé, en réaction à l'exposition à la molécule. Les procédés de la présente invention peuvent être utilisés pour identifier des drogues, des protéines ou toute autre molécule qui inhibent la fonction de protéines codées par des gènes cibles.

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