Testing for infestation of rapeseed and other cruciferae by...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C07K 14/37 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2092115

A method of testing for infestation of tissue of rape or other Cruciferae with a virulent strain of Leptosphaeria maculans. The method involves isolating DNA of L. maculans from the tissue; subjecting the isolated DNA to amplification by the polymerase chain reaction (PCR) using sets of primers derived from LMR1 [SEQ ID NO:11] (Genbank accession number M77515), a repetitive element of L. maculans specific to virulent strains of the fungus, to form a product containing amplified L. maculans DNA; preferably separating the amplified L. maculans DNA from the product; and detecting the presence of the amplified separated L. maculans DNA. The invention also relates to a method of deriving DNA of L. maculans from plant tissue for amplification by PCR, to the oligonucleotides forming the primers used in the PCR and to a diagnostic test kit which makes use of the method of testing.

Divulgation d'une méthode de dépistage de l'infection des tissus du colza ou d'autres crucifères par une souche virulente de Leptosphaeria maculans. La méthode consiste à isoler l'ADN de L. maculans dans les tissus; à le soumettre ensuite à l'amplification par la réaction en chaîne de la polymérase (PCR) en utilisant des séries d'amorces issues de LMR1 ¢SEQ ID NO : 11! (numéro d'entrée dans la banque de gènes), un élément répétitif de L. maculans spécifique aux souches virulentes du champignon, afin de former un produit contenant de l'ADN amplifié de L. maculans; de préférence, à séparer l'ADN amplifié de L. maculans du produit; et à en détecter la présence. L'invention a aussi trait à une méthode pour obtenir de l'ADN de L. maculans des tissus végétaux pour l'amplification par PCR, aux oligonucléotides formant les amorces utilisées dans la PCR et à la trousse de tests diagnostiques qui repose sur cette méthode d'analyse.

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