C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/55 (2006.01) A61K 39/102 (2006.01) C07K 14/285 (2006.01) C12N 9/16 (2006.01) C12N 9/22 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01)
Patent
CA 2232975
A protein from H. influenzae designated NucA is isolated and purified. The NucA protein has the amino acid sequence of amino acids 26-603 of SEQ ID NO.2 or a biologically equivalent amino acid sequence thereof. Amino acids 1-25 of SEQ ID NO.2 are the signal peptide, which is cleaved during processing of the mature protein. The NucA protein has a molecular weight of approximately 63,000 Daltons as measured on a 12 % SDS-PAGE gel and possesses 5'- nucleotidase activity. The NucA protein is obtained by isolation and purification from the H. influenzae organism, by chemical synthesis or by recombinant expression by an isolated and purified nucA DNA sequence which encodes the NucA protein. Such a DNA sequence hybridizes under standard high stringency Southern hybridization conditions with a DNA sequence encoding the NucA protein of H. influenzae having the amino acid sequence of amino acids 26- 603 of SEQ ID NO.2 or a biologically equivalent amino acid sequence thereof. The NucA protein is used to prepare a vaccine composition which elicits a protective immune response in a mammalian host to protect the host against disease caused by H. influenzae.
Une protéine provenant de H. influenzae, désignée NucA, a été isolée et purifiée. Cette protéine présente une séquence d'acides aminés comprenant les acides aminés 26-603 de SEQ ID No 2, ou une séquence d'acides aminés biologiquement équivalente. Les acides aminés 1 à 25 de SEQ ID No 2 sont le peptide-signal, qui est coupé au cours du traitement de la protéine mature. La protéine NucA a un poids moléculaire d'environ 63 000 Daltons, tel que mesuré sur gel d'électrophorèse SDS-PAGE à 12 % et présente une activité de 5'-nucléotidase. Elle est obtenue par isolation et purification à partir de l'organisme H. influenzae, par synthèse chimique, ou par expression recombinante par une séquence d'ADN nucA isolée et purifiée qui code la protéine NucA. Une telle séquence d'ADN s'hybride dans des conditions d'hybridation de Southern standard très rigoureuses avec une séquence d'ADN codant la protéine NucA de H. influenzae présentant la séquence d'acides aminés comprenant les acides aminés 26-603 de SEQ ID No 2, ou une séquence d'acides aminés biologiquement équivalente. La protéine NucA est utilisée pour préparer une composition vaccinale qui provoque une réponse immune de protection dans un mammifère hôte pour protéger l'hôte contre toute maladie causée par H. influenzae.
Jones Kevin Frederick
Ooi Peggy
Zagursky Robert John
American Cyanamid Company
Smart & Biggar
Wyeth Holdings Corporation
LandOfFree
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