C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/08 (2006.01) A61K 35/32 (2006.01) A61L 27/38 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2192064
The present invention relates to a method of stimulating the proliferation and appropriate cell maturation of a variety of different cells and tissues in three-dimensional cultures in vitro using TGF-.beta. in the culture medium. In accordance with the invention, stromal cells, including, but not limited to, chondrocytes, chondrocyte-progenitors, fibroblasts, fibroblast-like cells, umbilical cord cells or bone marrow cells from umbilical cord blood are inoculated and grown on a three-dimensional framework in the presence of TGF- .beta.. Stromal cells may also include other cells found in loose connective tissue such as endothelial cells, macrophages/monocytes, adipocytes, pericytes, reticular cells found in bone marrow stroma, etc. The stromal cells and connective tissue proteins naturally secreted by the stromal cells attach to and substantially envelope the framework composed of a biocompatible non- living material formed into a three-dimensional structure having interstitial spaces bridged by the stromal cells. The living stromal tissue so formed provides the support, growth factors, and regulatory factors necessary to sustain long-term active proliferation of cells in culture and/or cultures implanted in vivo. When grown in this three-dimensional system, the proliferating cells mature and segregate properly to form components of adult tissues analogous to counterparts in vivo.
L'invention concerne un procédé de stimulation de la prolifération et la maturation cellulaire appropriée d'une variété de différentes cellules et de différents tissus dans des cultures tridimensionnelles in vitro, à l'aide du TGF-.beta. dans le milieu de culture. Selon cette invention, des cellules du stroma, dont, entre autres, des chondrocytes, des cellules souches de chondrocytes, des fibroblastes, des cellules de type fibroblaste, des cellules du cordon ombilical ou des cellules de la moelle osseuse provenant du sang du cordon ombilical, sont inoculées et mises en culture sur un cadre tridimensionnel, en présence du TGF-.beta.. Les cellules du stroma peuvent également comprendre d'autres cellules que l'on trouve dans des tissus conjonctifs lâches tels que des cellules endothéliales, des macrophages/monocytes, des adipocytes, des péricytes, des cellules réticulaires du stroma de la moelle osseuse, etc. Les cellules du stroma et les protéines du tissu conjonctif sécrétées naturellement par les cellules du stroma se fixent et enveloppent sensiblement le cadre composé d'un matériau biocompatible non vivant formant une structure tridimensionnelle présentant des espaces interstitiels sur lesquels les cellules du stroma forment des ponts. Le tissu vivant du stroma ainsi obtenu fournit le support, les facteurs de croissance et les facteurs de régulation nécessaires pour obtenir une prolifération active à long terme de cellules dans la culture et/ou les cultures implantées in vivo. Lorsque les cellules de prolifération ont été mises en culture dans ce type de système tridimensionnel, elles parviennent à maturité et se séparent de manière appropriée pour former in vivo des constituants de tissus adultes analogues à leurs homologues.
Dunkelman Noushin
Naughton Brian A.
Naughton Gail K.
Purchio Anthony F.
Zimber Michael
Advanced Tissue Sciences Inc.
Osler Hoskin & Harcourt Llp
LandOfFree
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