C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01)
Patent
CA 2163658
Pharmacological agents active at the level of gene transcription are identified in high throughput drug screening assays. The methods involve combining a labeled transcription factor, a nucleic acid coupled to a ligand, a candidate pharmacological agent and a receptor immobilized on a solid substrate, such as a microtiter plate, filter, or bead. The nucleic acid has at least that portion of a nucleotide sequence naturally involved in the regulation of the transcription of the gene which is necessary for sequence-specific interaction with the transcription factor. The resultant combination is incubated under conditions whereby the receptor is bound to the ligand and, but for the presence of said candidate pharmacological agent, the transcription factor is sequence-specifically bound to the nucleic acid. Unbound transcription factor is then removed or washed from the solid substrate and labelled, sequence-specifically bound transcription factor is detected. Incubates which include candidate agents which alter transcription factor binding deviate from control incubates in terms of label signal - typically, binding is disrupted and the signal is diminished. In a preferred embodiment, the entire process is performed by a computer-controllable electromechanical robot with an axial rotatable arm.
On a identifié des agents pharmacologiques actifs au niveau de la transcription de gènes dans des dosages de criblage de médicaments à haut rendement. Les procédés consistent à combiner un facteur de transcription marqué, un acide nucléique couplé à un ligand, un agent pharmacologique potentiel ainsi qu'un récepteur immobilisé sur un substrat solide, tel qu'une plaque de microtitration, un filtre ou une bille. L'acide nucléique présente au moins la partie d'une séquence nucléotidique naturellement impliquée dans la régulation de la transcription du gène, laquelle est nécessaire à l'interaction à spécificité de séquence avec le facteur de transcription. On procède à l'incubation de la combinaison obtenue dans des conditions dans lesquelles le récepteur est lié au ligand et, excepté pour la présence dudit agent pharmacologique potentiel, le facteur de transcription est lié avec spécificité de séquence à l'acide nucléique. Le facteur de transcription non lié est ensuite retiré ou lavé du substrat solide et marqué, le facteur de transcription lié à spécificité de séquence est alors détecté. Les incubats comportant des agents potentiels modifiant la liaison du facteur de transcription s'écartent des incubats témoins en terme de signal de marquage, la liaison est interrompue et le signal est réduit. Dans un mode de réalisation préféré, tout le procédé est exécuté par un robot électromécanique géré par ordinateur doté d'un bras axial rotatif.
Baichwal Vijay R.
Peterson Michael G.
Strulovici Berta
Smart & Biggar
Tularik Inc.
LandOfFree
Transcription factor-dna binding assay does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Transcription factor-dna binding assay, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Transcription factor-dna binding assay will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-2081521