C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/81 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2259158
The invention is directed to a method of making a yeast artificial chromosome (YAC) comprising introducing into yeast cells a population of nucleic acids and a vector, wherein the vector comprises a yeast centromere, a selectable marker, a yeast telomere, and a sequence which can recombine with a region of a nucleic acid within the population of nucleic acids, whereby in vivo recombination makes the YAC. The invention is also directed to a method of making a YAC using two vectors and a method of making a circular YAC. The invention is also directed toward methods of making YACs with a selected nucleic acid insert from a mixed population of nucleic acids using transformation-associated recombination. The invention is further directed toward a method of cloning a selected nucleic acid from a population of nucleic acids into a vector comprising introducing into yeast cells a population of nucleic acids and the vector, wherein the vector comprises a specific sequence which can recombine with a region of the selected nucleic acid within the population of nucleic acids and a non-specific sequence which can recombine with the selected nucleic acid within the population of nucleic acids; whereby in vivo recombination makes a clone of the vector selected nucleic within the vector. The invention is also directed toward the products made by, and the vectors and reagents used in these methods. The invention is also directed toward a method of TAR cloning in E. coli.
L'invention concerne un procédé pour créer un chromosome artificiel de levure (YAC) comprenant l'introduction dans des cellules de levure d'une population d'acides nucléiques et d'un vecteur, dans lequel le vecteur comprend un centromère de levure, un marqueur choisi, un télomère de levure et une séquence qui peut se recombiner avec une région d'un acide nucléique de la population d'acides nucléiques, par lequel la recombinaison in vivo produit le chromosome YAC. L'invention concerne aussi un procédé de production d'un chromosome YAC au moyen de deux vecteurs et un procédé de production d'un chromosome YAC circulaire. L'invention décrit aussi des procédés de production d'un chromosome YAC avec un insert sélectionné d'acide nucléique d'une population mixte d'acides nucléiques utilisant une recombinaison à transformation associée (TAR). L'invention décrit en outre un procédé de clonage d'un acide nucléique sélectionné d'une population d'acides nucléiques dans un vecteur comportant l'introduction dans une population de cellules de levure d'acides nucléiques et du vecteur, dans lequel le vecteur comporte une séquence spécifique qui peut se recombiner avec une région de l'acide nucléique sélectionné, dans la population d'acides nucléiques et une séquence non spécifique qui peut se recombiner avec l'acide nucléique sélectionné dans la population d'acides nucléiques. De ce fait, la recombinaison in vivo produit dans le vecteur un clone du vecteur nucléique sélectionné. L'invention concerne aussi les produits dérivés, et les vecteurs et réactifs employés dans ces procédés. L'invention concerne enfin un procédé de clonage TAR dans E. coli.
Kouprina Natalay Y.
Larionov Vladimir L.
Perkins Edward L.
Resnick Michael A.
Gowling Lafleur Henderson Llp
The Government Of The United States Of America As Represented By Department Of Health And Human Services
LandOfFree
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