Transgenic animal model for spliceosome-mediated rna...

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/00 (2006.01) A01K 67/00 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2485038

The present invention relates to development of an animal model system for in vivo testing of spliceosome-mediated RNA trans-splicing reactions. The present invention provides transgenic animals, and methods for generating such animals, that have been genetically engineered to expresses a target precursor messenger RNA molecule (target pre-mRNA) that serves as a substrate for a trans-splicing reaction. Specifically, the transgenic animals contain at least one transgene capable of expressing a target pre-mRNA molecule. The invention provides methods, based on utilization of the transgenic animals, for assessing the specificity and efficiency of a pre-trans-splicing molecule (PTM) designed to interact with a target pre-mRNA and mediate a trans-splicing reaction resulting in the generation of a novel chimeric RNA molecule. The present invention further relates to the transgenic expression of PTM molecules in animals to determine gene function, i.e, functional genetics. The present invention is based on the successful generation of a transgenic animal expressing a target pre-mRNA and, moreover, the use of that animal to detect accurate in vivo trans-splicing reactions in the presence of a PTM.

La présente invention concerne le développement d'un système de modèle d'animal permettant de tester in vivo des réactions de la technique SMART. Cette invention a, notamment, trait à des animaux transgéniques et à des méthodes permettant de produire de tels animaux qui ont été génétiquement modifiés pour exprimer une molécule d'ARN messagère cible (pré-ARNm cible) qui sert de substrat pour une réaction de transépissage. Plus particulièrement, ces animaux transgéniques renferment au moins un transgène capable d'exprimer une molécule de pré-ARNm cible. Ladite invention a aussi pour objet des méthodes reposant sur l'utilisation d'animaux transgéniques, servant à déterminer la spécificité et l'efficacité d'une molécule de pré-transépissage destinée à interagir avec un pré-ARNm cible et à médier une réaction de transépissage résultant de la génération d'une nouvelle molécule d'ARN recombinant. Cette invention concerne également l'expression transgénique de molécules de pré-transépissage chez des animaux, afin de déterminer la fonction génique, c'est-à-dire, la génétique fonctionnelle. Ladite méthode de l'invention se fonde sur la génération réussie d'un animal transgénique exprimant un pré-ARNm cible et, plus précisément, l'utilisation de cet animal pour détecter des réactions précises de transépissage in vivo en présence d'une molécule de pré-transépissage.

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