Transgenically produced non-secreted proteins

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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Details

C12P 21/06 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01) C07K 1/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 9/88 (2006.01) C12N 15/00 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2281949

The invention provides a method of making and secreting a non-secreted protein. The method includes expressing the protein from a nucleic acid construct which includes: (a) a mammary epithelial specific promoter; (b) a milk protein specific signal sequence which can direct the secretion of a protein; (c) optionally, a sequence which encodes a sufficient portion of the amino terminal coding region of a secreted protein to allow secretion in the milk of a transgenic mammal, of the non-secreted protein; and (d) a sequence which encodes a non-secreted protein, wherein elements (a), (b), optionally (c), and (d) are preferably operatively linked in the order recited. Both glutamic acid decarboxylase (GAD) and myelin basic protein (MBP), which are cytoplasmic proteins, have been produced by the methods of the present invention. The invention also provides methods for treating diabetes and multiple sclerosis using proteins produced by the methods of the present invention.

L'invention concerne un procédé de production et de sécrétion d'une protéine non sécrétée. Le procédé comprend l'expression de la protéine à partir d'un acide nucléique de recombinaison comportant: (a) un promoteur spécifique épithélial mammaire; (b) une séquence-signal spécifique d'une protéine de lait pouvant diriger la sécrétion d'une protéine; (c) éventuellement, une séquence codant une partie suffisante de la région codante du N terminal d'une protéine sécrétée pour permettre la sécrétion, dans le lait d'un mammifère transgénique, de la protéine non sécrétée; et (d) une séquence codant une protéine non sécrétée, les éléments (a), (b), et éventuellement (c) et (d) étant de préférence liés pendant l'opération dans l'ordre cité. On a produit, selon les procédés de l'invention, un acide glutamique décarboxylase (GAD) et une protéine de base de myéline (MBP) qui sont des protéines cytoplasmiques. L'invention concerne également des méthodes de traitement de diabète et de sclérose en plaques par utilisation de protéines produites selon les procédés de la présente invention.

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