Ubiquitin conjugating enzymes having transcriptional...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/62 (2006.01) A61K 31/70 (2006.01) A61K 38/43 (2006.01) A61K 47/48 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 9/00 (2006.01) C12N 9/96 (2006.01) C12N 15/52 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) A61K 38/00 (2006.01)

Patent

CA 2230689

A human ubiquitin conjugating enzyme, designated hUBC-9, its full amino acid sequence, and nucleic acid polymers which encode hUBC-9 are disclosed. In addition to having functional ubiquitin conjugating activity, this enzyme has transcriptional repressor activity which is independent of the conjugating activity. The conjugating activity of hUBC-9 enhances transcription through degradation of transcription suppressor proteins such as WT1, and possibly, of hUBC-9 itself. The repressor activity of hUBC-9 suppress gene transcription, probably by disrupting the transcriptional initiation complex through specific interactions with the DNA binding region of the TATA binding protein (TBP). In use, hUBC-9, yUBC-9 and other ubiquitin conjugating enzymes having repressor activity can be fused to proteins having a DNA binding domain, such as Ga14, or used in conjunction with repressors such as Wilm's tumor suppressor gene product, WT1. Such enzymes and the nucleic acid polymers encoding them can be used for regulating transcription of a target gene in both pharmaceutical and non-pharmaceutical applications.

Enzyme de conjugaison d'ubiquitine humaine, appelée hUBC-9, sa séquence d'acides aminés complète et polymères d'acides nucléiques codant ce hUBC-9. Outre son activité de conjugaison fonctionnelle de l'ubiquitine, cette enzyme présente une activité de répression de transcription indépendante de son activité de conjugaison. L'activité de conjugaison du hUBC-9 favorise la transcription par la dégradation de protéines réprimant la transcription telles que WT1, et peut-être de hUBC-9 elle-même. L'activité de répression de hUBC-9 empêche la transcription des gènes, sans doute par l'interruption du complexe de départ de transcription, par des interactions spécifiques avec la région de liaison d'ADN de la protéine de liaison de l'antigène TATA (TOP). En pratique, hUBC-9, yUBC-9 et d'autres enzymes de conjugaison d'ubiquitine présentant une activité de répression peuvent être fusionnées avec des protéines présentant un domaine de liaison d'ADN, par exemple Gal4, ou utilisés en association avec de répresseurs tels que le gène suppresseur associé à la tumeur de Wilm, WT1. Ces enzymes et les polymères d'acide nucléique les codant peuvent être utilisés pour réguler la transcription d'un gène cible dans des applications pharmaceutiques et non pharmaceutiques.

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