Ubiquitin-specific protease

Details Ubiquitin-specific protease Ubiquitin-specific protease

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/57 (2006.01) C07K 14/00 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 9/60 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12P 21/06 (2006.01)

Patent

CA 2079229

A ubiquitin-specific protease which cleaves ubiquitin from any protein or peptide to which ubiquitin is joined and the gene encoding the protease are disclosed. The protease specifically cleaves the peptide bond in a fusion of ubiquitin to a protein or peptide between the carboxyl-terminal amino acid residue of a ubiquitin moiety and the .alpha.-amino group of any non-ubiquitin protein or peptide to which ubiquitin is joined. Recombinant expression vectors containing a DNA sequence encoding the ubiquitin-specific protease can be used to transform cells for production of the protease or to provide the cell with the ability to proteolytically deubiquitinate, in vivo, ubiquitin fusions co-produced by the cell. The protease can also be isolated and used to deubiquitinate ubiquitin fusions in vitro. For those proteins or peptides whose functional activity is inhibited or otherwise modified by th e presence of a ubiquitin moiety, this moiety can be used as a temporary inhibitor (or modifier) of the activity of a protein or peptide, whith the ubiquitin-specific protease employed to restore, by deubiquitination, the original activity of the protein or peptide.

Protéase spécifique de l'ubiquitine, laquelle clive l'ubiquitine provenant de n'importe quelle protéine ou de n'importe quel peptide auquel l'ubiquitine est jointe, et gène codant la protéase. La protéase clive spécifiquement la liaison peptidique dans une fusion d'ubiquitine à une protéine ou a un peptide entre le reste d'acides aminés à terminaison carboxyle d'une fraction d'ubiquitine et le groupe alpha-amino de n'importe quelle protéine ou de n'improte quel peptide de non-ubiquitine auquel l'ubiquitine est jointe. On peut utiliser des vecteurs d'expression recombinés contenant une séquence d'ADN codant la protéase spécifique de l'ubiquitine afin de transformer des cellules permettant la production de la protéase ou afin de produire la cellule ayant la capacité de procéder à une désubiquitinisation protéolytique, in vivo, de fusions d'ubiquitine coproduites par la cellule. On peut également isoler la protéase et l'utiliser afin de désubiquitiner des fusions d'ubiquitine iota vitro). Pour les protéines ou les peptides dont on peut inhiber ou modifier l'activité fonctionnelle par la présence d'une fraction d'ubiquitine, on peut utiliser cette fraction en tant qu'inhibiteur (ou modificateur) temporaire de l'activité d'une protéine ou d'un peptide, la protéase spécifique de l'ubiquitine étant utilisée pour rétablir, par désubiquitinisation, l'activité originale de la protéine ou du peptide.

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