Use of rna polymerase to improve nucleic acid amplification...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P

Patent

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Details

C12P 19/34 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2195209

This invention relates to the use of a eukaryotic or prokaryotic DNA- directed RNA polymerase of a class that synthesizes cellular RNA, in a process for the amplification of a specific nucleic acid sequence or of its complement. It also relates to a new process for amplifying a specific nucleic acid sequence. The process includes one or more reactions which may take place in a single reaction vessel. In one instance, in a first reaction, the process includes providing a first RNA polymerase which uses a DNA first template to synthesize an RNA first template, and, in a second reaction, providing the RNA first template and a number of other reagents such that the reagents use the RNA first template to synthesize a DNA second template and an RNA second template. Thereafter a cycle ensues in which the reagents use the RNA second template to synthesize a DNA third template and multiple copies of the RNA second template. The RNA second template is the specific nucleic acid sequence or its complement. This invention includes a kit containing the reagents of this invention.

L'invention se rapporte à l'utilisation d'ARN polymérase ADN-dépendante eucaryote ou procaryote, appartenant à une classe qui synthétise l'ARN cellulaire, dans un procédé d'amplification d'une séquence d'acide nucléique spécifique ou de son complément. L'invention se rapporte également à un nouveau procédé d'amplification d'une séquence d'acide nucléique spécifique. Ce procédé comprend une ou plusieurs réactions qui peuvent s'effectuer dans une cuve de réaction unique. Dans un aspect du procédé, on prévoit, pour une première réaction, une première ARN polymérase qui utilise une première matrice d'ADN pour synthétiser une première matrice d'ARN; et on utilise, pour une deuxième réaction, la première matrice d'ARN et un certain nombre d'autres réactifs qui utilisent la première matrice d'ARN pour synthétiser une deuxième matrice d'ADN et une deuxième matrice d'ARN. Un cycle est par la suite établi, au cours duquel les réactifs utilisent la deuxième matrice d'ARN pour synthétiser une troisième matrice d'ADN et des copies multiples de la deuxième matrice d'ARN. Cette dernière est la séquence d'acide nucléique spécifique ou son complément. Cette invention comprend une trousse contenant les réactifs selon l'invention.

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Profile ID: LFCA-PAI-O-1823406

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