C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/12 (2006.01) A01H 1/04 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/65 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01) G01N 33/58 (2006.01)
Patent
CA 2502460
A method for the production of transgenic plants is provided in which a vector carrying a gene encoding the green fluorescent protein is introduced into cells, the cells are screened for the protein and transformed cells are selected and regenerated. The cellular toxicity of the green fluorescent protein is circumvented by regulating expression of the gene encoding the protein or directing the protein to a subcellular compartment where it is not toxic to the cell. DNA constructs are provided for cell transformation in which the expression of a gene encoding the green fluorescent protein is placed under the control of an inducible promoter. In addition, DNA constructs are provided in which a nucleotide sequence encoding the green fluorescent protein is operably linked to a signal sequence which directs the expressed protein to a subcellular compartment where the protein is not toxic to the cell. Oxidative stress to plant cells transformed with GFP also can be ameliorated by transforming cells with an expression vector comprising genes encoding GFP and an oxygen scavenger enzyme such as superoxide dismutase. The toxicity of GFP in transformed plants can be eliminated by excising the screenable marker gene following detection of transformed cells or sectors. The FLP/FRT system is used in conjunction with GFP as a visible marker for transformation and FRT excision. A nucleotide sequence optimized for expression of the green fluorescent protein in plants is also provided.
Divulgation d'une méthode de production de plantes transgéniques, pour laquelle un vecteur porteur d'un gène codant pour la protéine fluorescente verte est introduit dans des cellules, celles porteuses de cette protéine sont criblées et celles transformées sont triées et régénérées. La toxicité pour la cellule de la protéine fluorescente verte est neutralisée par la régulation de l'expression du gène codant cette protéine ou en dirigeant cette dernière dans un compartiment sous-cellulaire où elle est sans effet toxique sur la cellule. On divulgue des gènes hybrides d'ADN pour une transformation cellulaire au cours de laquelle l'expression d'un gène codant la protéine fluorescente verte dépend d'un promoteur inductible. De plus, on divulgue des gènes hybrides d'ADN qui contiennent une séquence de nucléotides codant la protéine fluorescente verte, séquence fonctionnellement liée à une séquence signal qui dirige la protéine exprimée vers un compartiment sous-cellulaire où elle n'exerce pas d'effet toxique sur la cellule. Le stress oxydatif exercé sur les cellules végétales porteuses de la GFP peut aussi être atténué en transformant les cellules au moyen d'un vecteur d'expression comprenant des gènes codant la GFP et d'une enzyme piégeant l'oxygène comme la superoxyde dismutase. La toxicité de la GFP dans les plantes modifiées peut être supprimée par l'excision du gène marqueur repérable suite à la détection des cellules ou des secteurs transformés. Le système FLP/FRT est employé en conjonction avec la GFP à titre de marqueur visible de la transformation et de l'excision de la séquence FRT. On divulgue aussi une séquence de nucléotides optimisée pour l'expression de la protéine fluorescente verte dans des plantes.
Bidney Dennis
Bowen Benjamin
Gordon-Kamm William
Miller Mike
Pierce Dorothy
Pioneer Hi-Bred International Inc.
Torys Llp
LandOfFree
Use of the green fluorescent protein as a screenable marker... does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Use of the green fluorescent protein as a screenable marker..., we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Use of the green fluorescent protein as a screenable marker... will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-1621680