Vectors having enhanced expression and methods of making and...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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Details

C12N 15/63 (2006.01) A61K 39/12 (2006.01) A61K 39/285 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01)

Patent

CA 2283462

Disclosed and claimed are vectors having enhanced expression and methods for making and using them. Enhancement of expression is from substantially co-temporal expression of at least one first nucleic acid molecule and at least one second nucleic acid molecule. The second nucleic acid molecule encodes a translation factor. The contemporaneous expression can be from operably linking the first and second nucleic molecules to a single promoter, or from operably linking the first nucleic acid molecule to a first promoter and the second nucleic molecule to a second promoter wherein the first and second promoters function substantially contemporaneously. Thus, the first and second nucleic acid molecules can be at the same locus in the vector or at different loci. The second nucleic acid molecule can encode one translation factor or more than one translation factor. The translation factor can be a K3L open reading frame, an E3L open reading frame, a VAI RNA, and EBER RNA, a sigma 3 open reading frame, a TRBP open reading frame, or combinations thereof. The vector can be a poxvirus such as an attenuated poxvirus; for instance, a NYVAC vaccinia virus or an ALVAC canarypox virus.

L'invention concerne des vecteurs, présentant une expression améliorée, ainsi que des procédés permettant de les fabriquer et de les utiliser. L'amélioration de l'expression résulte d'une expression sensiblement simultanée d'au moins une première molécule d'acides nucléiques et d'au moins une seconde molécule d'acides nucléiques. Ladite seconde molécule code un facteur de traduction. L'expression contemporaine peut être obtenue en liant de manière fonctionnelle la première et la seconde molécules d'acides nucléiques à un promoteur unique, ou en liant de manière fonctionnelle la première molécule d'acides nucléiques à un premier promoteur et la seconde molécule d'acides nucléiques à un second promoteur, le premier et le second promoteurs fonctionnant de manière sensiblement contemporaine. Ainsi, la première et la seconde molécules d'acides nucléiques peuvent se situer dans le même locus du vecteur ou dans des loci différents. La seconde molécule d'acides nucléiques peut coder un ou plusieurs facteurs de traduction. Le facteur de traduction peut être un cadre ouvert de lecture K3L, un cadre ouvert de lecture E3L, un ARN I associé à un virus, un ARN EBER, un cadre ouvert de lecture sigma 3, un cadre ouvert de lecture TRBP, ou des combinaisons de ces cadres. Le vecteur peut être un poxvirus tel qu'un poxvirus atténué, par exemple, un virus de la vaccine NYVAC ou un virus canarypox ALVAC.

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