C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/864 (2006.01)
Patent
CA 2535680
Bone marrow-derived mesenchymal stem cells were transduced with a stimulus- responsive rAAV vector system that detects and responds to hypoxia in cardiac tissue. A first rAAV vector in the system contains a cardiac-specific promoter linked to a sequence encoding an oxygen-sensitive chimeric transactivator containing a GAL4 DNA binding domain, an oxygen-dependent degradation domain, and a p65 activation domain. A second rAAV vector contains a cardioprotective gene linked to a GAL4 UAS. The first rAAV vector expresses the chimeric transactivator specifically in the heart, and in response to hypoxia, the transactivator binds to the GAL4 upstream activating sequence (UAS) in the second rAAV vector. Binding of the transactivator to the UAS results in the expression of the cardioprotective gene. The rAAV vectors can be used to treat cells in a number of other disease states, including diabetes, cancer, stroke, and atherosclerosis. These approaches to stem cell-based gene therapy provide a novel strategy not only for treatment but for prevention of cell destruction.
Des cellules souches du système mésenchymateux tirées de la moelle osseuse ont été transduites avec un vecteur rAAV réagissant à un stimulus qui détecte une hypoxie dans le tissu cardiaque et y répond. Un premier vecteur rAAV du système contient un promoteur spécifique du coeur relié à une séquence codant pour un transactivateur chimère dépendant de l'oxygène, qui contient un domaine de liaison de l'ADN GAL4, un domaine de dégradation dépendant de l'oxygène et un domaine d'activation p65. Un second vecteur rAAV contient un gène cardioprotecteur relié à GAL4 UAS. Le premier vecteur rAAV exprime le transactivateur chimère spécifiquement dans le coeur lequel transactivateur, en réponse à une hypoxie, se lie à la séquence activatrice amont (UAS) GAL4 dans le second vecteur rAAV. La liaison du transactivateur à UAS se traduit par l'expression du gène cardioprotecteur. Les vecteurs rAAV peuvent s'utiliser pour traiter des cellules dans divers autres états pathologiques tels que diabète, cancer, attaques cardiaques et athérosclérose. Ces approches de la thérapie génique à base de cellules souches constituent une nouvelle stratégie non seulement pour le traitement, mais aussi pour la prévention de la destruction cellulaire.
Phillips M. Ian
Tang Yao Liang
Mbm Intellectual Property Law Llp
University Of South Florida
LandOfFree
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