Wide dynamic range nucleic acid detection using an aggregate...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/70 (2006.01)

Patent

CA 2221454

The present invention provides a method of detecting the amount of a target sequence which may be present in a test sample. The method uses an aggregate primer series, which comprises at least two primer sets, in an amplification reaction to detect the relative concentration of a target sequence which may be present in a test sample. The primer sets have different sensitivities and hybridize with sub-target sequences which are different regions of the target sequence. The method generally comprises cycling a test sample suspected of containing a target sequence, an aggregate primer series, and means necessary for performing an amplification reaction; and detecting any amplified sub- target sequences. Based on a qualitative detection of the amplified sub-target sequences generated by individual primer sets, the relative quantity of the target sequence can be determined.

La présente invention concerne un procédé pour détecter la quantité d'une séquence cible qui peut être présente dans un échantillon. Le procédé fait appel à une série complexe d'amorces comprenant au moins deux jeux d'amorces, dans une réaction d'amplification pour détecter la concentration relative d'une séquence cible qui peut être présente dans un échantillon. Les jeux d'amorces ont des sensibilités différentes et s'hybrident avec des séquences secondaires correspondant à différentes régions de la séquence cible. D'une manière générale, le procédé en question est un procédé cyclique appliqué à un échantillon contenant potentiellement la séquence cible, une série complexe d'amorces et un moyen nécessaire à une réaction d'amplification, après quoi toute séquence secondaire amplifiée est détectée. La détermination qualitative des séquences secondaires amplifiées produites grâce aux jeux individuels d'amorces permet de déterminer la quantité relative de la séquence cible.

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