C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/81 (2006.01) C07K 14/435 (2006.01) C07K 14/62 (2006.01) C07K 14/81 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 1/19 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)
Patent
CA 2050336
A polypeptide for production in yeast comprises a fusion of a signal peptide, a leader peptide and a heterologous protein or polypeptide. The polypeptide is modified in its amino acid sequence adjacent to a yeast processing site positioned between the C-terminal end of the leader peptide and the N-terminal end of the heterologous protein so as to provide a presentation of the processing site which makes it accessible to proteolytic cleavage. Such a presentation is provided by adding one or more amine acids (at least one of which is negatively charged) to either the C-terminal end of the leader or the N-terminal end of the protein or both. The heterologous protein may, for instance, be aprotinin or insulin precursor or an analogue thereof.
Un polypeptide destiné à être produit en levure comprend une fusion d'un peptide signal, d'un peptide de tête et d'une protéine ou d'un polypeptide hétérologues. Le polypeptide est modifié dans sa séquence d'acides aminés ajdacente à un site de traitement de levure situé entre l'extrémité de terminaison C du peptide de tête et l'extrémité de terminaison N de la protéine hétérologue, de façon à fournir une présentation du site de traitement qui rend accessible celui-ci au clivage protéolytique. On assure une telle présentation en ajoutant un ou plusieurs acides aminés (dont au moins un est chargé négativement) soit à l'extrémité de terminaison C du peptide de tête soit à l'extrémité de terminaison N de la protéine, ou aux deux. La protéine hétérologue peut par exemple être constituée par un précurseur d'aprotinine ou d'insuline ou par un analogue de ce précurseur.
Bjorn Soren
Norris Fanny
Norris Kjeld
Mccarthy Tetrault Llp
Novo Nordisk A/s
LandOfFree
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