Method for the detection of the antibiotic resistance...

C - Chemistry – Metallurgy – 40 – B

Patent

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C40B 40/06 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12N 15/31 (2006.01) C12N 15/54 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01) C12Q 1/18 (2006.01)

Patent

CA 2192364

Method for the detection of the antibiotic resistance spectrum of Mycobacterium species present in a sample, possibly coupled to the identification of the Micobacterium species involved, comprising the steps of: (i) if need be releasing, isolating or concentrating the polynucleic acids present in the sample; (ii) if need be amplifying the relevant part of the antibiotic resistance genes present in said sample with at least one suitable primer pair, (iii) hybridizing the polynucleic acids of step (i) or (ii) with at least one of the rpoB gene probes, as specified in table 2, under the appropriate hybridization and wash conditions; (iv) detecting the hybrids formed in step (iii); (v) inferring the Mycobacterium antibiotic resistance spectrum, and possibly the Mycobacterium species involved from the differential hybridization signal(s) obtained in step (iv).

Procédé de détection du spectre de résistance antibiotique de l'espèce Mycobacterium présente dans un échantillon, susceptible d'être adjoint au procédé d'identification de l'espèce Mycobacterium concernée, comprenant les étapes consistant: (i) si nécessaire, à libérer, isoler et concentrer les acides polynucléiques présents dans l'échantillon; (ii) si nécessaire, à amplifier la partie pertinente des gènes de résistance antibiotique présents dans ledit échantillon à l'aide d'au moins une paire d'amorces appropriées; (iii) à hybrider les acides polynucléiques de l'étape (i) ou (ii) avec au moins une des sondes du gène <u>rpo</u>B, comme spécifié sur le tableau 2, dans des conditions appropriées d'hybridation et de lavage; (iv) à détecter les hybrides formés dans l'étape (iii); et (v) à déduire le spectre de résistance antibiotique du Mycobacterium, et éventuellement l'espèce de Mycobacterium concernée, à partir du ou des signaux d'hybridation différentiels obtenus dans l'étape (iv).

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