Methods and algorithms for cell enumeration in a low-cost...

G - Physics – 06 – K

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G06K 9/00 (2006.01) C12Q 1/00 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01) G01N 33/543 (2006.01) G01N 33/567 (2006.01)

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CA 2474509

The enumeration of cells in fluids by flow cytometry is widely used across many disciplines such as assessment of leukocyte subsets in different bodily fluids or of bacterial contamination in environmental samples, food products and bodily fluids. For many applications the cost, size and complexity of the instruments prevents wider use, for example, CD4 analysis in HIV monitoring in resource-poor countries. The device, methods and algorithms (Fig. 1) disclosed herein largely overcome these limitations and can be used in remote location. Briefly, this invention includes the techniques for labeling the fluorescent cells in biological sample and counting the magnetically selected fluorescent cells in the biological sample.

Le comptage de cellules dans des fluides par cytométrie de flux est très répandu dans de nombreuses disciplines comme évaluation des sous-ensembles de leucocytes dans différents fluides biologiques ou de contamination bactérienne dans des échantillons du milieu, des produits alimentaires ou des fluides biologiques. Dans de nombreuses applications, le coût, les dimensions et la complexité des instruments empêche une utilisation plus répandue, par exemple, l'analyse CD4 dans le contrôle du VIH dans le tiers monde. Le dispositif, les procédés et les algorithmes décrits surmontent ces limitations. En bref, toutes les cellules dans un échantillon biologique sont étiquetées de manière fluorescente, mais uniquement les cellules cibles sont également étiquetées magnétiquement. L'échantillon étiqueté, dans une chambre ou dans une cuvette, est placé entre les deux aimants en biseau de façon à déplacer de manière sélective les cellules étiquetées magnétiquement à la surface d'observation de la cuvette. Une diode électroluminescente éclaire les cellules et une caméra à dispositif à transfert de charge capture les images de la lumière fluorescente émise par les cellules cibles. L'analyse d'image effectuée au moyen d'un nouveau algorithme donne un nombre de cellules sur la surface qui peut être mis en rapport avec la concentration de cellules cibles de l'échantillon d'origine. Le système cytomère compact produit une technique robuste, à un coût abordable et facile à mettre en pratique, qui peut être utilisé dans des emplacements à distance.

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