Reversible oxidation of protein tyrosine phosphatases

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/42 (2006.01)

Patent

CA 2475606

The invention relates to a method of identifying any protein tyrosine phosphatase (PTP) that undergoes reversible modification of PTP active site invariant cysteine within a cell, such that the phosphatase is transiently protected from irreversible active site invariant cysteine-directed PTP inactivating agents. Methods related to regulation of PTPs by reactive oxygen species (ROS) in a cellular environment are provided. Multiple PTPs are shown to be reversibly oxidized and inactivated following treatment of cells with HZOZ or with physiological stimuli that promote ROS formation, and inhibition of PTP function is shown to contribute to ROS~induced mitogenesis. Transient oxidation of the PTP catalytic site invariant cysteine is exploited in methods to identify which of multiple candidate PTPs are components of a given biological signal transduction pathway, without a requirement for first specifically purifying any particular candidate PTP.

L'invention concerne un procédé d'identification de n'importe quelle protéine tyrosine phosphatase (PTP) subissant une modification réversible de cystéine invariante de site actif de PTP à l'intérieur d'une cellule, de telle manière que la phosphatase est protégée de façon transitoire d'agents d'inactivation irréversible de PTP dirigés par cystéine invariante de site actif. L'invention concerne également des procédés liés à la régulation de PTP par un type d'oxygène réactif (ROS) dans un environnement cellulaire. On a montré que des PTP multiples sont oxydées et inactivées de façon réversible après traitement de cellules avec H¿2?O¿2? ou avec des stimuli physiologiques favorisant la formation de ROS, et on a montré que l'inhibition de la fonction PTP contribue à la mitogenèse induite par ROS. L'oxydation transitoire de la cystéine invariante de site catalytique de PTP est exploitée dans des procédés visant à identifier lesquelles des PTP candidates multiples sont des composantes d'une voie de transduction de signal biologique donnée, sans nécessiter une première purification spécifique de n'importe quelle PTP candidate particulière.

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