Method and apparatus for the storage of entomopathogenic...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 5/18 (2006.01) A01K 67/00 (2006.01) A01K 67/033 (2006.01) A01N 25/34 (2006.01) A01N 63/00 (2006.01)

Patent

CA 2345755

Third stage juvenile (J3) entomopathogenic nematodes are prepared for storage by being induced into a state of cryptobiosis. The induction of cryptobiosis is effected by mixing an aqueous cream of the J3 nematodes with anhydrous, small particles (average maximum dimension less than 300µm) of non-fibrous cellulose. The proportions of the aqueous cream and non-fibrous cellulose particles are such that, after equilibration, the mixture has a water activity in the range 0.80 to 0.995. Preferably an anti-fungal agent is included in the aqueous cream. To store the cryptobiotic J3 nematodes, the mixture is preferably kept in a container (10), fitted with an attachment which maintains the water activity in the container at a required value. The attachment includes a rigid tube (13, 26) that connects the interior of the container with a chamber (14, 24) that is vented to ambient atmosphere by small apparatus (16). When in use the chamber contains water-absorbent material (18) saturated with water or with a saturated salt solution, and the tube (13, 26) contains an air-permeable plug (17). An alternative attachment comprises a plastic envelope (32), one face (34) of which is stuck to the wall of the container (30). Small apertures (36) in the face (34) are aligned with apertures (31) in the container wall. Small apertures (37) in the other face (33) connect the inside of the envelope (32) to ambient atmosphere. In use, the envelope contains a water-absorbent material (18) saturated with water or a salt solution, and at least one spacer member (35).

On prépare, dans le cadre de cette invention, des nématodes entomo-pathogènes juvéniles au stade trois (J3) en vue de leur conservation et ce, en les mettant en état de cryptobiose. On provoque cet état en mélangeant à un coulis aqueux renfermant des nématodes J3 de petites particules (d'une taille maximale moyenne inférieure à 300 µm) anhydres de cellulose non fibreuse. Les proportions du coulis aqueux et des particules de cellulose non fibreuses sont telles, qu'après équilibration, le mélange a une activité de l'eau comprise entre 0,80 et 0,995. On incorpore, de préférence, un agent antifongique à ce coulis. On conserve, aux fins du stockage des nématodes cryptobiotiques, le mélange dans un récipient (10) pourvu d'un dispositif maintenant l'activité de l'eau dans le récipient au seuil requis. Ce dispositif comprend un tube rigide (13, 26) reliant l'intérieur du récipient à une enceinte (14, 24) mise à l'air libre par un petit appareil (16). En cours d'utilisation, cette enceinte contient un matériau absorbant l'eau (18) saturé en eau ou en solution saline saturée et le tube (13, 26) comporte un bouchon perméable à l'air (17). Un autre type de dispositif est constitué d'une enveloppe en matière plastique (32) dont une face (34) est collée à la paroi du récipient (30). De petites ouvertures (36) ménagées dans une face (34) viennent s'aligner sur des ouvertures (31) ménagées dans la paroi du récipient. De petites ouvertures (37) ménagées dans l'autre face (33) mettent l'intérieur de l'enveloppe (32) en contact avec l'air ambiant. En cours d'utilisation, l'enveloppe contient un matériau absorbant l'eau (18) saturé en eau ou en solution saline et au moins un élément d'écartement (35).

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