C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/86 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/867 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)
Patent
CA 2328404
Novel packaging cell lines which produce recombinant retrovirus, free of detectable helper-virus are disclosed. Also disclosed are methods of making the cell lines and methods of producing recombinant retroviruses from the cell lines. Retroviruses produced by the cell lines include lentiviruses, such as HIV, capable of transfering heterologous DNA to a wide range of non-dividing cells. The packaging cells contain at least three vectors which collectively encode retroviral gag, pol, and env proteins, wherein the gag and pol genes are separated, in part, onto two or more different vectors. This is made possible by fusing Vpr or Vpx to pol proteins separated from gag so that the proteins are targeted to assembling virions. Among other advantages, the packaging cells provide the benefit of increased safety when used in human gene therapy by virtually eliminating the possibility of molecular recombination leading to production of replication-competant helper virus.
L'invention concerne de nouvelles lignées de cellules d'encapsidation qui produisent des rétrovirus recombinants exempts de virus auxiliaires détectables, ainsi que des procédés pour produire des lignées cellulaires et pour fabriquer des rétrovirus recombinants à partir de ces lignées cellulaires. Les rétrovirus fabriqués par les lignées cellulaires comprennent des lentivirus, tels que le VIH, capables de transférer un ADN hétérologue à un large spectre de cellules ne se divisant pas. Les cellules d'encapsidation contiennent au moins trois vecteurs qui codent ensemble pour les protéines rétrovirales gag, pol et env, les gènes gag et pol étant partiellement séparés en deux ou plusieurs vecteurs différents. Cet effet est obtenu par la fusion de Vpr ou Vpx avec les protéines pol séparées de celles gag; de cette manière, les protéines sont dirigées sur des virions d'assemblage. Parmi les avantages des cellules d'encapsidation on peut citer une plus grande sécurité lors de l'utilisation dans la thérapie génique des humains car on élimine pratiquement toute possibilité de recombinaison moléculaire qui mènerait à la production d'un virus auxiliaire responsable de la réplication.
Leboulch Philippe
Westerman Karen
Borden Ladner Gervais Llp
Genetix Pharmaceuticals Inc.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1496801