Mutant proteins and methods for producing them

Details Mutant proteins and methods for producing them Mutant proteins and methods for producing them

C - Chemistry, Metallurgy

12

N

C12N 15/10 (2006.01) C07K 14/72 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01)

Patent

CA 2708037

A method of producing a mutant G-protein coupled receptor (GPCR) with increased stability relative to its parent GPCR, the method comprising: a) providing one or more mutants of a first parent GPCR with increased stability relative to the first parent GPCR b) identifying in a structural membrane protein model the structural motif or motifs in which the one or more mutants have at least one different amino acid residue compared to the first parent GPCR, and c) making one or more mutations in the amino acid sequence that defines a corresponding structural motif or motifs in a second parent GPCR, to provide one or more mutants of a second parent GPCR with increased stability relative to the second parent GPCR. Mutants of .beta.-adrenergic receptor, adenosine receptor and neurotensin receptor are also disclosed.

Méthode de production d'un récepteur couplé à une protéine G mutante (GPCR) présentant une stabilité accrue par rapport au GPCR parent. La méthode consiste: (a) à prendre un ou plusieurs mutant du GPRC parent présentant par rapport une stabilité accrue par rapport à ce dernier; (b) à identifier dans un modèle structurel de protéine à membrane le ou les motifs dans lequel ou lesquels un ou plusieurs mutants ont au moins un résidu d'acide aminé différent par comparaison avec le premier (GPCR); et (c) procéder à une ou à des mutations dans la séquence d'acides aminés qui définit le ou les motifs structurels correspondants dans un second GPRC parent de manière à obtenir de ce dernier un ou des mutants à la stabilité accrue. L'invention concerne également des mutants du récepteur ß-adrénergique, du récepteur de l'adénosine et du récepteur de la neurotensine.

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