New high capacity binary shuttle vector

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/84 (2006.01) A01H 5/00 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/68 (2006.01) C12N 15/74 (2006.01) C12N 15/82 (2006.01)

Patent

CA 2216596

The invention provides a high capacity binary shuttle vector having T-DNA region and Ri ori and capable to integrate a large genome fragment in it; a genomic library having the ability to transform a plant, especially monocotyledonous ones; a plant transformed with the high capacity binary shuttle vector; and a method of searching for a useful gene by use of the above vector. The present high capacity binary shuttle vector can introduce a large genome fragment of 10 kb or more, easily, efficiently and stably into a plant, especially monocotyledonous ones under those conditions in which the rearrangement or deletion of these genome fragments does not occur. The invention also provides some other vectors derived from the above Ri ori driven vectors, which can integrate circular genome library plasmids with a lox site, or which can efficiently transform plants with genes of arbitrary expression properties. The invention includes also the assessment method for the functions of genome fragments inserted in the above vectors by complementation assay. In addition, a useful gene or gene complex can be efficiently examined so its isolation is also made easy.

Vecteur navette binaire haute capacité, possédant une région DNA-T et un ori Ri et la capacité d'intégrer un grand fragment de génome; banque génomique ayant la capacité de transformer une plante, notamment des monocotylédones; plante transformée à l'aide dudit vecteur; méthode de recherche d'un gène utile grâce à ce vecteur. Le présent vecteur peut introduire facilement, efficacement et de façon stable, un grand fragment génomique de 10 kb ou plus dans une plante, notamment une monocotylédone, et ce dans des conditions où il n'y aura pas réarrangement ni délétion de ces fragments génomiques. L'invention divulgue également certains autres vecteurs dérivés des vecteurs à ori Ri ci-dessus, qui peuvent intégrer des plasmides de banques génomiques circulaires avec un site lox, ou qui peuvent transformer efficacement les plantes grâce à des gènes aux propriétés d'expression arbitraires. L'invention présente également une méthode d'évaluation pour les fonctions des fragments génomiques insérés dans les vecteurs ci-dessus par des tests de complémentation. De plus, un gène ou complexe génique utile peut être examiné efficacement, facilitant ainsi son isolation.

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