C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 7/02 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01)
Patent
CA 2555412
The invention provides a method for the purification of a virus from a host cell, said method comprising the steps of: a) culturing host cells, b) infecting said host cells with a virus, c) treating the cell culture with nuclease, d) lysing said host cells to provide a lysate comprising the virus. The virus is preferably a recombinant adenovirus. The invention further provides a method for the purification of a recombinant virus expressing a heterologous protein that is capable of binding nucleic acid, comprising the steps of: a) culturing host cells, b) infecting said host cells with said recombinant virus, c) lysing said host cells to provide a lysate comprising said recombinant virus, d) subjecting the recombinant virus to anion exchange chromatography and size exclusion chromatography, characterized in that the virus containing mixture is buffer exchanged at least once with a solution comprising at least 2 M NaCl, or another salt providing an equivalent ionic strength.
L'invention concerne un procédé de purification d'un virus à partir d'une cellule hôte, ce procédé comprenant plusieurs étapes consistant : a) à cultiver des cellules hôtes, b) à infecter ces cellules hôte avec un virus , c ) à traiter la culture cellulaire avec un nucléase, d) à lyser ces cellules hôtes afin de fournir un lysat comprenant le virus. Ce virus consiste de préférence en un adénovirus recombinant. Cette invention porte aussi sur un procédé de purification d'un virus recombinant exprimant une protéine hétérologue capable de se lier à un acide nucléique. Ce procédé comporte plusieurs étapes consistant a) à cultiver les cellules hôtes, b) à infecter lesdites cellules hôtes avec le virus recombinant, c) à lyser ces cellules hôtes pour obtenir un lysat contenant le virus recombinant, d) à soumettre le virus recombinant à une chromatographie par échange d'anions et à une chromatographie sur gel, et se caractérise par le fait que le mélange contenant le virus soit soumis à échange de tampon au moins une fois avec une solution contenant au moins 2 M NaCl, ou un autre sel fournissant une force ionique équivalente.
Van Corven Emile Joannes Josephus Maria
Weggeman Miranda
Borden Ladner Gervais Llp
Crucell Holland B.v.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1597992