Apparatus and method for measuring the fluorescence of large...

G - Physics – 01 – N

Patent

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G01N 35/10 (2006.01) G01N 1/00 (2006.01) G01N 15/14 (2006.01)

Patent

CA 2669723

Apparatus and methods for measuring the fluorescence of large multi-cellular organisms in a sample (102, 804) of liquid includes a pumping mechanism, a fluorescence measuring device (104), a method of analyzing (100, 300, 508) the measurements, and optionally, a sorting mechanism (502). The pumping mechanism transfers large multi-cellular organisms from a reservoir (402, 836) through a fluorescence-measuring device (104) causing minimum physical damage and/or stress. The pressure differential driving the organisms from a sample container/reservoir through the measuring device can be derived from gravity (800), air pressure (412), or liquid pressure, or some combination of the three. The fluorescence can be measured in a cytometer using a light detector or imager (106). Generally the detection element will include a filter (114), isolating the wavelength of fluorescent emission. The illumination may be provided by a laser (112) or by an LED (302), combined with the use of dichroic mirrors to allow multiple wavelength simultaneous illumination. In addition, an LED will typically be used with a filter to isolate the optimum excitation wavelength while blocking scattered/reflected LED light from the detection element (but not the fluorescence).

L'invention concerne un appareil et des procédés pour mesurer la fluorescence de grands organismes multicellulaires dans un échantillon (102, 804) de liquide. L'appareil comporte un mécanisme de pompage; un dispositif de mesure de fluorescence (104); un procédé d'analyse des mesures (100, 300, 508); et facultativement, un mécanisme de tri (502). Le mécanisme de pompage transfère de grands organismes multicellulaires hors d'un réservoir (402, 836) à travers un dispositif de mesure de fluorescence (104) provoquant une détérioration et/ou une contrainte physique minimum. Le différentiel de pression entraînant les organismes hors d'un conteneur/réservoir d'échantillon à travers le dispositif de mesure peut être dérivé de la gravité (800), d'une pression d'air (412), ou d'une pression de liquide, ou de toute combinaison des trois. La fluorescence peut être mesurée dans un cytomètre en utilisant un détecteur de lumière ou un dispositif d'imagerie (106). Généralement, l'élément de détection comprend un filtre (14), isolant la longueur d'onde de l'émission fluorescente. L'éclairage peut être fourni par un laser (112) ou par une diode électroluminescente (LED) (302), en combinaison avec l'utilisation de miroirs dichroïques pour permettre l'éclairage simultané de multiples longueurs d'onde. Habituellement, une LED est utilisée avec un filtre pour isoler la longueur d'onde d'excitation optimale tout en bloquant une lumière de LED diffusée/réfléchie provenant de l'élément de détection (sans bloquer la fluorescence).

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