C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) A61K 39/00 (2006.01) C07H 21/02 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 15/09 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01)
Patent
CA 2329122
This invention provides methods of obtaining novel polynucleotides and encoded polypeptides by the use of non-stochastic methods of directed evolution (DirectEvolution.TM.). A particular advantage of exonuclease-mediated reassembly methods is the ability to reassemble nucleic acid strands that would otherwise be problematic to chimerize. Exonuclease-mediated reassembly methods can be used in combination with other mutagenesis methods provided herein. These methods include non-stochastic polynucleotide site-saturation mutagenesis (Gene Site Saturation Mutagenesis.TM.) and non-stochastic polynucleotide reassembly (GeneReassembly.TM.). This invention provides methods of obtaining novel enzymes that have optimized physical and/or biological properties. Through use of the claimed methods, genetic vaccines, enzymes, small molecules, and other desirable molecules can be evolved towards desirable properties. For example, vaccine vectors can be obtained that exhibit increased efficacy for use as genetic vaccines. Vectors obtained by using the methods can have, for example, enhanced antigen expression, increased uptake into a cell, increased stability in a cell, ability to tailor an immune response, and the like. Furthermore, this invention provides methods of obtaining a variety of novel biologically active molecules, in the fields of antibiotics, pharmacotherapeutics, and transgenic traits.
Cette invention a trait à des méthodes permettant d'obtenir de nouveaux polynucléotides ainsi que des polypeptides codés et ce, en faisant intervenir des techniques non stochastiques d'évolution dirigée (Direct Evolution<TM>). Ces méthodes de réassemblage d'acide nucléique induit par l'exonucléase présentent un avantage particulier, savoir la capacité à réassembler des brins nucléotidiques qui, autrement, poseraient des problèmes s'agissant de leur chimérisation. On peut utiliser ces méthodes de réassemblage d'acide nucléique induit par l'exonucléase, associées à d'autres méthodes de mutagenèse décrites dans cette invention. Ces méthodes reposent sur la mutagenèse à saturation de site polynucléotidique non stochastique (Gene Site Saturation Mutagenesis<TM>) ainsi que sur le réassemblage polynucléotidique non stochastique (Gene Reassembly<TM>). Cette invention porte également sur des méthodes d'obtention de nouvelles enzymes aux propriétés physiques et/ou biologiques optimisées. Il est possible, grâce à ces méthodes, de faire évoluer des vaccins génétiques, des enzymes, de petites molécules et d'autres molécules souhaitées vers des propriétés voulues. On peut par exemple obtenir des vecteurs de vaccins à efficacité accrue et les utiliser comme vaccins génétiques. Les vecteurs obtenus grâce à ces méthodes peuvent présenter, par exemple, une expression antigénique accrue, une assimilation accrue dans la cellule, une stabilité accrue dans la cellule, une capacité à adapter la réponse immunitaire, et analogue. Par ailleurs, cette invention concerne des procédés de préparation de diverses nouvelles molécules actives du point de vue biologique dans le domaine des antibiotiques, de la pharmacothérapie, et des caractères transgéniques.
Diversa Corporation
Mbm Intellectual Property Law Llp
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1628390