C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
P
530/13, 195/33.1
C12P 21/02 (2006.01) C07K 14/585 (2006.01) C12N 9/02 (2006.01) C12N 9/14 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)
Patent
CA 2025350
Processes for the production of a peptide of the formula (III): R-X-NH2 , wherein X-NH2 represents a C-terminal .alpha.-amidated amino acid and R represents a remaining portion of the peptide, starting from any step in a series of the following steps: (1) obtaining a fused protein of the formula (0): P-R-X-Gly-B, wherein P represents a partner protein of the fused protein, X represents any amino acid residue, Gly represents a glycine residue, B represents a C-terminal basic amino acid or a basic oligopeptide, and R represents a remaining portion of the peptide, by a gene recombination method; (2) recovering the fused protein; (3) cleaving the fused protein to form a partner protein (P) and a peptide of the formula (I): R-X-Gly-B; (4) separating the peptide (I) from the partner protein (P) on the basis of the difference of the isoelectric points thereof; (5) hydrolyzing the peptide (I) with carboxypeptidase B to form an intermediate peptide of the formula (II) R-X-Gly; and (6) treating the peptide (II) with a C-terminal .alpha.-amidating enzyme.
Procédé de production d'un peptide de formule (III): R-X-NH2, dans laquelle X-NH2 représente un acide aminé alpha-amidé à terminaison C et R représente la partie résiduelle du peptide, en commençant par une étape quelconque parmi la série d'étapes suivantes, qui consistent à (1) obtenir une protéine fusionnée de formule (0): P-R-X-Gly-B, dans laquelle P représente une protéine partenaire de la protéine fusionnée, X représente tout résidu d'acide aminé, Gly représente un résidu de glycine, B représente un acide aminé basique à terminaison C ou un oliogopeptide basique, et r représente une partie résiduelle du peptide, par un procédé de recombinaison de gènes; (2) récupérer la protéine fusionnée; (3) cliver la protéine fusionnée pour former une protéine partenaire (P) et un peptide de formule (I): R-X-Gly-B; (4) séparer le peptide (I) de la protéine partenaire (P) en fonction de la différence entre leurs points isoélectriques; (5) idrolyser le peptide (I) avec la carboxypeptidase B pour former un peptide intermédiaire de formule (II) R-X-Gly; et (6) traiter le peptide (II) avec une enzyme d'alpha-amidation à terminaison C.
Magota Koji
Ohsuye Kazuhiro
Tanaka Shoji
Asubio Pharma Co. Ltd.
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
Suntory Limited
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1648149