Instrument for monitoring polymerase chain reaction of dna

G - Physics – 01 – N

Patent

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Details

G01N 21/63 (2006.01) C12M 1/36 (2006.01) C12M 1/40 (2006.01)

Patent

CA 2566924

An optical instrument monitors PCR replication of DNA in a reaction apparatus having a temperature cycled block with vials of reaction ingredients including dye that fluoresces in presence of double-stranded DNA. A beam splitter passes an excitation beam to the vials to fluoresce the dye. An emission beam from the dye is passed by the beam splitter to a CCD detector from which a processor computes DNA concentration. A reference strip with a plurality of reference emitters emit reference beams of different intensity, from which the processor selects an optimum emitter for compensating for drift. Exposure time is automatically adjusted for keeping within optimum dynamic ranges of the CCD and processor. A module of the beam splitter and associated optical filters is associated with selected dye, and is replaceable for different dyes.

Un instrument d'optique permet d'observer la réplication d'amplification en chaîne par polymérase (PCR) d'ADN dans un appareil de réaction pourvu d'un bloc à cycles de températures, avec des fioles d'ingrédients réactifs qui comprennent une teinture qui devient fluorescente en présence d'ADN à double brin. Un séparateur de faisceau transmet un faisceau d'excitation aux fioles pour rendre la teinture fluorescente. Un faisceau d'émission provenant de la teinture est transmis par le séparateur de faisceau à un détecteur à dispositif à couplage de charges (CCD) à partir duquel un processeur calcule la concentration d'ADN. Une lamelle de référence avec de multiples émetteurs de référence émet des faisceaux de référence d'intensités différentes, à partir desquels le processeur sélectionne l'émetteur optimal pour compenser la dérive. Le temps d'exposition est réglé automatiquement pour rester à l'intérieur des plages dynamiques optimales du CCD et du processeur. Un module du séparateur de faisceau et des filtres optiques associés, est associé à la teinture sélectionnée, et il est remplaçable pour des teintures différentes.

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