C - Chemistry – Metallurgy – 12 – P
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
P
C12P 21/00 (2006.01) C12N 1/14 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 9/24 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) C12N 15/79 (2006.01)
Patent
CA 2412701
Cell lines having genetically modified glycosylation pathways that allow them to carry out a sequence of enzymatic reactions, which mimic the processing of glycoproteins in humans, have been developed. Recombinant proteins expressed in these engineered hosts yield glycoproteins more similar, if not substantially identical to their human counterparts. The lower eukaryotes, which ordinarily produce high-mannose containing N-glycans, including unicellular and multicellular fungi are modified to produce N-glycans such as Man5GlcNAc2 or other structures along human glycosylation pathways. This is achieved using a combination of engineering and/or selection of strains which: do not express certain enzymes which create the undesirable complex structures characteristic of the fungal glycoproteins, which express exogenous enzymes selected either to have optimal activity under the conditions present in the fungi where activity is desired, or which are targeted to an organelle where optimal activity is achieved, and combinations thereof wherein the genetically engineered eukaryote expresses multiple exogenous enzymes required to produce "human-like" glycoproteins.
L'invention concerne le développement de lignées cellulaires qui possèdent des voies de glycosylation génétiquement modifiées qui leur permettent de réaliser une séquence de réactions enzymatiques, imitant le traitement des glycoprotéines chez l'homme. Des protéines recombinantes exprimées dans ces hôtes génétiquement modifiés donnent des glycoprotéines plus semblables sinon sensiblement identiques à leurs homologues humaines. Les eucaryotes inférieurs, qui produisent classiquement des N-glycanes à haute teneur en mannose, y compris des champignons unicellulaires et multicellulaires, sont modifiés afin de produire des N-glycanes tels que le Man¿5?GlcNAc¿2? ou d'autres structures rencontrées dans les voies de glycosylation humaine. Cette possibilité est réalisée par l'utilisation d'une combinaison de génie génétique et/ou de sélection de souches: qui n'expriment pas certaines enzymes responsables de structures complexes indésirables, caractéristiques des glycoprotéines fongiques, qui expriment des enzymes exogènes sélectionnées pour avoir une activité optimale dans les conditions présentes dans les champignons dans lesquels l'activité est recherchée, ou qui sont ciblées sur un organite dans lequel est réalisé une activité optimale, et par l'utilisation de combinaisons dans lesquelles l'eucaryote génétiquement modifié exprime plusieurs enzymes exogènes nécessaires à la production de glycoprotéines de "type humain".
Glycofi Inc.
Smart & Biggar
LandOfFree
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