Method for the amplification of hla class i alleles

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2365924

The present invention relates to a method and to specific primers for the locus-specific, separate amplification of exon 2, exon 3 and/or exon 4 of HLA- A, HLA-B or HLA-C alleles, making use of at least one primer set wherein: for the amplification of exon 2, the reverse primer specifically hybridizes to a locus-specific target sequence in intron 2 of respectively HLA-A, HLA-B or HLA- C; for the amplification of exon 3, the forward primer specifically hybridizes to a locus-specific target sequence in intron 2 of respectively HLA-A, HLA-B or HLA-C and/or the reverse primer specifically hybridizes to a locus-specific target sequence in intron 3 of respectively HLA-A, HLA-B or HLA-C; for the amplification of exon 4, the forward primer specifically hybridizes to a locus- specific target sequence in intron 3 of respectively HLA-A, HLA-B or HLA-C. In accordance, the present invention provides an improved method for the typing or subtyping of HLA Class I alleles making use of the amplification method of the invention.

L'invention concerne une technique et des amorces spécifiques permettant l'amplification séparée spécifique de locus de l'exon 2, l'exon 3, et/ou l'exon 4 des allèles HLA-A, HLA-B ou HLA-C, utilisant au moins un premier ensemble d'amorces. Pour amplifier l'exon 2, l'amorce inverse s'hybride spécifiquement avec une séquence cible spécifique de locus dans l'intron 2 des allèles respectifs HLA-A, HLA-B ou HLA-C. Pour amplifier l'exon 3, l'amorce avant s'hybride spécifiquement avec une séquence cible spécifique de locus dans l'intron 2 des allèles respectifs HLA-A, HLA-B ou HLA-C et/ou l'amorce inverse s'hybride spécifiquement avec une séquence cible spécifique de locus dans l'intron 3 des allèles respectifs HLA-A, HLA-B ou HLA-C. Pour amplifier l'exon 4, l'amorce avant s'hybride spécifiquement avec une séquence cible spécifique de locus dans l'intron 3 des allèles respectifs HLA-A, HLA-B ou HLA-C. En conséquence, l'invention fournit une technique permettant de typer ou de sous-typer des allèles HLA de classe I utilisant la technique d'amplification de ladite invention.

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