Specific and sensitive nucleic acid detection method

Details Specific and sensitive nucleic acid detection method Specific and sensitive nucleic acid detection method

C - Chemistry, Metallurgy

12

Q

C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2308762

The invention relates to a method for detecting a nucleic acid, comprising the following steps: the production of a number of enhancers of a fragment of said nucleic acid with a length of less than 100 nucleotides using two primers, one of said primers being able to bind to a first binding sequence (A) of a strand of the nucleic acid and the other primer being able to bind to a second binding sequence (C') which is essentially complementary to a sequence (C), said sequence (C) not overlapping with (A) and being positioned in the direction 3' from A, in the presence of a probe with a binding sequence (D) which is able to bind to the third sequence (B) positioned between the sequences (A) and (C) or the complement (B') thereof, said probe containing a reporter group and a quencher group, using a polymerase with 5' nuclease activity; and detection of the nucleic acid through the measurement of a signal which is determined by the release of the reporter group.

L'invention concerne un procédé pour la détection d'un acide nucléique, consistant à préparer une pluralité de produits amplifiés d'un tronçon de cet acide nucléique présentant une longueur inférieure à 100 nucléotides, à l'aide de deux amorces, dont une peut se fixer à une première séquence de liaison (A) d'un brin de l'acide nucléique et dont l'autre peut se fixer à une deuxième séquence de liaison (C) sensiblement complémentaire d'une séquence (C) située dans le sens 3' de A sans la chevaucher, en présence d'une sonde munie d'une séquence de liaison (D), laquelle peut se fixer à la troisième séquence (B) située entre les séquences (A) et (C) ou bien à son complément (B'), cette sonde contenant un groupe marqueur et un groupe modérateur, en utilisant une polymérase à activité 5'-nucléase, et à détecter l'acide nucléique en mesurant un signal, lequel est conditionné par la libération du groupe marqueur.

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