Molecular regulatory circuits to achieve sustained...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/63 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01) C07K 14/47 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01) C12N 15/12 (2006.01) C12N 15/67 (2006.01) C12N 15/85 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)

Patent

CA 2326401

The exposure of cells, tissues and organs to "stress", such as elevated temperature, stimulates production of active heat stress transcription factors (HSF), which in tum, induce expression of genes regulated by stress promoters. Normally, the activity of stress promoters declines after cells, tissues and organs are returned to a normal condition. Mutant forms of HSF, however, can constitutively transactivate stress genes, in the absence of stress. By taking advantage of such mutant HSF, molecular circuits can be devised to provide a sustained expression of a gene of interest using a single application of stress. One form of molecular circuit comprises (a) a first nucleic acid molecule that comprises a gene encoding a transcription factor and a promoter activatable by stress and by the transcription factor, wherein the stress-activatable promoter and the transcription factor gene are operably linked, and (b) a second nucleic acid molecule that comprises a gene of interest and a second promoter activatable by the transcription factor, wherein the second promoter and the gene of interest are operably linked.

On expose des cellules, des tissus et des organes à un stress, tel qu'une température élevée, pour stimuler la production de facteurs de transcription du stress thermique (HSF) actifs, lesquels, à leur tour, induisent une expression de gènes régulée par des promoteurs du stress. Normalement, l'activité des promoteurs du stress diminue après le retour à la normale des cellules, des tissus et des organes. Des formes mutantes de HSF peuvent, cependant, transactiver de manière constitutive des gènes du stress, en l'absence de stress. En tirant parti de tels HSF mutants, on peut diviser des circuits moléculaires de façon à obtenir une expression soutenue d'un gène d'intérêt au moyen d'une seule application de stress. Une forme de circuit moléculaire comporte (a) une première molécule d'acide nucléique comprenant un gène codant un facteur de transcription et un promoteur pouvant être activé par stress et par le facteur de transcription, où le promoteur pouvant être activé par stress et le gène du facteur de transcription sont liés fonctionnellement, et (b) une seconde molécule d'acide nucléique comprenant un gène d'intérêt et un second promoteur pouvant être activé par le facteur de transcription, où le second promoteur et le gène d'intérêt sont liés fonctionnellement.

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