Test strip and method for determining concentration of...

G - Physics – 01 – N

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G01N 33/70 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) G01N 21/78 (2006.01) G01N 33/52 (2006.01)

Patent

CA 2483585

Apparatus and method for determining concentration of creatinine in whole blood or plasma using a 1-methylhydantoinase (NMHase) catalyzed reaction, wherein the (NMHase) used in the reaction has its own substrate, NMH, bound thereto. The present invention uses commercially available NMHase and thus eliminates prior art stabilization procedures for NMHase. Conveniently, known Trinder reagents and oxidative couplers are used for the indicator system. It has been found that by judiciously selecting the reagents used for the indicator system and/or varying the amount of enzyme NMHase that is loaded into the assay, the effect of the blank reaction can be minimized in the dynamic range of interest such that concentration of creatinine in normal and pathological levels can be measured directly without having to adjust for a blank reaction caused by bound NMH.

La présente invention concerne un appareil et un procédé permettant de déterminer la concentration de créatinine dans du sang total ou dans du plasma total à l'aide d'une réaction catalysée par la 1-méthylhydantoïnase (NMHase), la NMHase utilisée dans la réaction présentant son propre substrat, la NMH, liée à cette dernière. La présente invention fait appel à la NMHase disponible dans le commerce et élimine par conséquent les procédures de stabilisation de la NMHase des techniques antérieures. Des réactifs de Trinder et des coupleurs oxydants connus sont utilisés pour le système indicateur, sans inconvénient. On a découvert qu'en sélectionnant judicieusement les réactifs utilisés pour le système indicateur et/ou en faisant varier la quantité d'enzymes de NMHase qui est chargée dans le test, l'effet de la réaction de blanche peut être réduit au minimum dans la gamme dynamique d'intérêt, de sorte que la concentration de créatinine dans des niveaux normaux et pathologiques peut être mesurée directement sans avoir à corriger une réaction blanche provoquée par la NMH liée.

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