C - Chemistry – Metallurgy – 12 – M
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
M
C12M 3/00 (2006.01) C12N 15/89 (2006.01) A61K 48/00 (2006.01)
Patent
CA 2275474
The present invention is directed to a method of incorporating foreign material into cells that exist in a non-adherent state. In some embodiments, the method employs a microinjection needle together with an adhesive molecule or apparatus capable of immobilizing cells that exist in a non-adherent state onto a substrate or other surface capable of supporting cell attachment to permit introduction of a desired material, such as nucleic acid, into the cell. The non-adherent cells can be genetically altered by the microinjection of nucleic acid sequences (DNA) of sufficient size to permit direct introduction of said nucleic acid into the chromosomal DNA of the cell, without the use of a retrovirus, adenovirus, or other carrier molecule. The invention also thus provides a method of gene therapy insofar as cells modified according to the defined method, particularly undifferentiated cells such as stem cells, may be created to include a gene or fragment thereof sufficient to replace a deficiency or correct an abnormality or deficiency in the cell, and used in a patient by injection of the cells. The corrected nucleic acid then gives rise to genetically corrected differentiated cell species, and hence an approach useful in treating a number of physiological disorders.
L'invention concerne une méthode permettant d'introduire un matériel étranger dans des cellules qui se trouvent dans un état non adhérent. Dans certains modes de réalisation, la méthode fait appel à une aiguille à micro-injection et à une molécule ou un dispositif adhésif capable d'immobiliser les cellules à l'état non adhérent sur un substrat ou une autre surface permettant la fixation des cellules, de façon que le matériel désiré, tel que l'acide nucléique, puisse être introduit dans la cellule. Les cellules non adhérentes peuvent être génétiquement modifiées par micro-injection de séquences d'acide nucléique (ADN) ayant une taille suffisante pour permettre l'introduction directe dudit acide nucléique dans l'ADN chromosomique de la cellule, sans qu'il soit nécessaire d'utiliser des rétrovirus, des adénovirus ou une autre molécule support. L'invention concerne donc également une méthode de thérapie génique, dans la mesure où elle permet de produire des cellules modifiées selon la méthode définie ici, notamment des cellules indifférenciées telles que des cellules souches, qui possèdent un gène ou un fragment de gène suffisant pour compenser un manque ou corriger une anomalie ou une déficience de la cellule, et de les injecter chez un patient. L'acide nucléique corrigé donne naissance à des espèces cellulaires différenciées génétiquement corrigées, ce qui est une approche utile pour traiter de nombreux troubles physiologiques.
Brown David
Davis Brian
Borden Ladner Gervais Llp
Genesystems Inc.
LandOfFree
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