C - Chemistry – Metallurgy – 07 – H
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
07
H
C07H 21/00 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2170604
The present invention provides compositions and methods for isolating nucleic acids with lengths greater than about 50 bases, from cells, gels, solutions and other media, in which nucleic acids occur in vivo or in vitro. The compositions of the invention are mixtures of the silica materials silica gel and glass particles, particularly glass microfibers; such mixtures combined with chaotropic salts, such as guanidinium chloride or guanidinium thiocyanate; and suspensions of such mixtures in aqueous solutions of chaotropic salts. In the methods of the invention, an aqueous solution comprising nucleic acid is mixed with an aqueous solution of chaotropic salts and the resulting solution is contacted with a mixture of the silica materials, whereupon the nucleic acid in the solution binds to the silica materials. The chaotropic salts and components, other than the nucleic acid adsorbed to the silica materials, from the aqueous solution treated by the method of the invention are washed from the silica materials. Finally, the nucleic acid can be obtained by elution from the silica materials. The methods provide nucleic acid in water or buffer, such as TE buffer, free of contamination by any salt or macromolecule that would interfere with further processing or analysis.
La présente invention concerne des compositions et des procédés pour isoler des acides nucléiques d'une longueur supérieure à environ 50 bases, à partir de cellules, gels, solutions et autres milieux dans lesquels les acides nucléiques se présentent in vivo ou in vitro. Les compositions de l'invention sont des mélanges des matériaux siliceux gel de silice et particules de verre, en particulier des microfibres de verre; de tels mélanges combinés avec des sels chaotropes tels que le chlorure de guanidinium ou le thiocyanate de guanidinium; et les suspensions de tels mélanges dans des solutions aqueuses de sels chaotropes. Dans les procédés de l'invention, une solution aqueuse contenant l'acide nucléique est mélangée avec une solution aqueuse de sels chaotropes et la solution résultante est mise en contact avec un mélange des matériaux siliceux. A ce moment, l'acide nucléique dans la solution se lie aux matériaux siliceux. Les sels chaotropes et les composants de la solution aqueuse, traitée selon le procédé de l'invention, autres que l'acide nucléiquee adsorbé sur les matériaux siliceux sont élués des matériaux siliceux. Finalement, l'acide nucléique peut être obtenu par élution à partir des matériaux siliceux. Les procédés permettent d'obtenir l'acide nucléique dans de l'eau ou dans un tampon tel qu'un tampon TE, exempt de contamination par des sels ou des macromolécules qui pourraient interférer avec des traitements ou des analyses ultérieurs.
Burkiewicz Adam
Padhye Vikas V.
York Chuck
Borden Ladner Gervais Llp
Promega Corporation
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1827905