C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/85 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01)
Patent
CA 2166850
The invention relates to secretory gene trap vectors and methods of using such vectors to isolate extracellular proteins and to make cells and organisms with mutant secretory genes. The vectors encode a type II transmembrane domain and a lumen -sensitive indicator marker and optionally, a selectable marker and an exon-splice acceptor site. The gene isolation methods involve stably introducing the secretory trap vectors into an endogenous gene whereby the expression of the resultant fusion protein provides a differential expression of the indicator marker depending on whether the endogenous gene provides an N-terminal signal sequence.
La présente invention concerne des vecteurs « gene-trap » sécrétoires et les méthodes pour utiliser ces vecteurs pour isoler des protéines extracellulaires et fabriquer des cellules et des organismes dotés de gènes sécrétoires mutants. Les vecteurs codent un domaine transmembrane de type II et un marqueur indicateur sensible à la lumière et, facultativement, un marqueur sélectionnable et un site accepteur d'exon épissé. La méthode pour isoler le gène consiste à introduire de façon stable les vecteurs pièges sécrétoires dans un gène endogène, ce qui permet à la protéine de fusion résultante d'exprimer différemment le marqueur indicateur selon que le gène endogène donne une séquence signal N-terminale.
Smart & Biggar
University Of Edinburgh
LandOfFree
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