C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/54 (2006.01) C07K 19/00 (2006.01) C12N 9/10 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2353603
A novel gene defining a novel human UDP-GlcNAc: Gal;G1 cNAc.beta. 1-3GalNAc .alpha..beta.1. 6GlcNAc-transferase, C2/4GnT. with unique enzymatic properties is disclosed. The enzymatic activity of C2/4GnT is shown to be distinct from that of previously identified enzymes of this gene family. The invention discloses isolated DNA molecules and DNA construct encoding C2/4GnT and derivatives thereof by way of amino acid deletion, substitution or insertion exhibiting C2/4GnT activity, as well as cloning and expression vectors including such DNA, cells transfected with the vectors, and recombinant methods for providing C2/4GnT. The enzyme C2/4GnT and C2/GnT-active derivatives thereof are disclosed, in particular soluble derivatives comprising the catalytically active domain of C2/4GnT. Further, the invention discloses methods of obtaining 1,6-N- acetyl glucosaminyl glycosylated saccharides, glucopeptides or glucoproteins by use of an enzymically active C2/4GnT protein or fusion protein thereof a by using cells stably transfected with a vector including DNA encoding an enzymatically active C2/4GnT protein as an expression system for recombinant production of such glycopeptides or glycoproteins. Also a method for the identification of DNA sequence variations in the C2/4GnT gene by isolating DNA from a patient, amplifying C2/4GnT-coding exons by PCR. and detecting the presence of DNA sequence variation, are disclosed.
L'invention concerne un nouveau gène définissant une nouvelle UDP-GlcNAc: Gal/Gl cNAc beta 1-3GalNAc alpha beta 1, 6GlcNAc-transférase humaine, appelée C2/4GnT, dotée de propriétés enzymatiques uniques. L'activité enzymatique de C2/4GnT s'est avérée être différente de celle des enzymes de cette famille de gènes identifiées à ce jour. L'invention concerne aussi des molécules d'ADN isolées et des produits d'assemblage d'ADN codant pour C2/4GnT et ses dérivés présentant l'activité de C2/4GnT et obtenus par délétion, substitution ou insertion d'acides aminés ainsi que des vecteurs de clonage et d'expression comprenant l'ADN, des cellules transfectées par les vecteurs et des procédés d'obtention de C2/4GnT par recombinaison. L'invention concerne en outre l'enzyme C2/4GnT et ses dérivés actifs C2/4GnT, plus particulièrement des dérivés solubles comprenant le domaine à activité catalytique de C2/4GnT. L'invention concerne aussi des procédés d'obtention de saccharides glycosylés,6-N-acétylglucosaminyle, des glycopeptides ou des glycoprotéines grâce à une protéine de fusion ou à une protéine de C2/4GnT à activité enzymatique ou encore grâce à des cellules transfectées de manière stable par un vecteur comprenant un ADN codant pour une protéine C2/4GnT à activité enzymatique servant de système d'expression pour la production par recombinaison de ces glycopeptides ou glycoprotéines. L'invention concerne finalement l'identification des variations des séquences d'ADN dans le gène C2/4GnT consistant à isoler l'ADN d'un patient, à amplifier par PCR les exons codant pour C2/4GnT et à détecter la présence de la variation des séquences d'ADN.
Clausen Henrick
Schwientek Tilo
Clausen Henrick
Glycozym Aps
Norton Rose Or S.e.n.c.r.l. S.r.l./llp
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1886056