Determination of immunoglobulin encoding nucleid acid

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C07K 16/00 (2006.01) C12P 21/00 (2006.01)

Patent

CA 2738001

It is reported herein a method for the determination of the amount of immunoglobulin-encoding mRNA compris-ing: a) providing a sample, b) performing a polymerase chain reaction for amplifying the light chain with the primers of SEQ ID NO: 23 and 24 and the probe of SEQ ID NO: 33, and/or c) performing a polymerase chain reaction for amplifying the heavy chain with the primers of SEQ ID NO: 19 and 21 and the probe of SEQ ID NO: 40, and d) quantitating with an efficiency of 2Ø The primers with SEQ ID NOs 23 and 24 bind at positions CL 247-266 and CL166-185, respectively, and the probe with SEQ ID NO: 33 binds at 189-212 in human IgG koppa chain. The primer with SEQ ID NO: 19 binds at CH region 2 position 220-237 and the primer with SEQ ID NO: 21 binds at CH region 3 position 114-133. Finally the probe with SEQ ID NO: 40 binds from position 315 in CH2 to position 7 in CH3.

L'invention concerne un procédé de détermination de la quantité d'ARNm codant pour l'immunoglobuline, comprenant les étapes suivantes : a) la fourniture d'un échantillon, b) l'exécution d'une réaction en chaîne par polymérase destinée à amplifier la chaîne légère avec les amorces de SEQ ID N° : 23 et 24 et la sonde de SEQ ID N° : 33 et/ou c) l'exécution d'une réaction en chaîne par polymérase destinée à amplifier la chaîne lourde avec les amorces de SEQ ID N° : 19 et 21 et la sonde de SEQ ID N° : 40 et d) la quantification avec un rendement de 2,0. Les amorces possédant les SEQ ID N°23 et 24 se lient aux positions CL 247-266 et CL166-185, respectivement, et la sonde possédant la SEQ ID N° : 33 se lie à la position 189-212 de la chaîne koppa de l'IgG humaine. L'amorce possédant la SEQ ID N° : 19 se lie à la position 220-237 de la région CH 2 et l'amorce possédant la SEQ ID N° : 21 se lie à la position 114-133 de la région CH 3. Enfin, l'amorce possédant la SEQ ID N° : 40 se lie à partir de la position 315 en CH2 à la position 7 dans CH3.

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