C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 9/00 (2006.01) C12N 9/80 (2006.01) C12N 11/02 (2006.01) C12N 11/06 (2006.01) C12N 11/08 (2006.01)
Patent
CA 2263717
Methods for purifying enzymes, in particular, acylases characterized by selectively aggregating and precipitating contaminating enzymes, in particular, deacetylases with the use of surfactants, in particular, cationic surfactants; methods for regenerating immobilized enzyme carriers, in particular, those made from synthetic absorbents or ion exchange resins by treating immobilized enzymes prepared by bonding the enzymes to the carriers optionally followed by cross-linking with proteases; methods for regenerating carriers as described above wherein the carriers are porous ones; and methods for regenerating carriers as described above wherein the enzyme is a cephalosporin C acylase. By the above methods for purifying enzymes, contaminating enzymes which are undesirable for the target enzymes but cannot be eliminated by the conventional separation techniques can be selectively eliminated. Thus, these methods are useful in the production of highly pure enzyme specimens. Compared with the conventional methods, the above-mentioned methods for regenerating immobilized enzyme carriers make it possible to very efficiently eliminate the enzymes from the carriers, in particular, porous ones through digestion with proteases. Therefore, the carriers can be used repeatedly, which makes these methods useful from the viewpoints of the environment and cost.
Procédés permettant de purifier des enzymes, notamment des acylases, caractérisés par le fait que l'on agrège et précipite sélectivement les enzymes contaminantes, notamment les désacétylases, au moyen d'agents tensioactifs, notamment de tensioactifs cationiques; procédés permettant de régénérer les supports d'enzymes immobilisées, notamment ceux constitués d'absorbants synthétiques ou de résines échangeuses d'ions, en traitant les enzymes immobilisées, que l'on prépare en fixant les enzymes sur les supports, puis éventuellement en les réticulant avec des protéases; procédés permettant de régénérer les supports décrits ci-dessus, lesdits supports étant poreux; et procédés permettant de régénérer les supports décrits ci-dessus, l'enzyme étant une céphalosporine C acylase. Les procédés de purification d'enzymes décrits ci-dessus permettent d'éliminer sélectivement les enzymes contaminantes qui sont indésirables pour les enzymes cibles, mais qui ne peuvent pas être éliminées par les techniques de séparation classiques. Ces procédés sont donc utiles pour produire des échantillons d'enzymes extrêmement pures. Par comparaison avec les procédés classiques, les procédés de régénération des supports d'enzymes immobilisées décrits ci-dessus permettent d'éliminer très efficacement les enzymes des supports, notamment poreux, par digestion avec des protéases. Les supports peuvent ainsi être utilisés de manière répétée, ce qui rend ces procédés intéressants du point de vue de l'environnement et du coût.
Fujisawa Pharmaceutical Co. Ltd.
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
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