Systems and methods for cryopreservation of cells

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – M

Patent

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Details

C12M 3/00 (2006.01) A01N 1/02 (2006.01) C12N 1/00 (2006.01) C12N 1/04 (2006.01)

Patent

CA 2656139

An auto-nucleating device includes a hollow tube containing a crystalline cholesterol matrix therein. The ends of the tube are closed by a membrane that is impermeable to the cholesterol but permeable to liquids contained in a cryopreservation vessel. The auto- nucleating device is disposed within the vessel and provides a site for ice nucleation during freezing of the liquid within the vessel. One such cryopreservation vessel is a flexible vial having a closed port at one adapted to be pierced by a needle to withdraw the liquid within. The opposite end of the vial is initially open to receive the liquid. The end is then sealed to form a closed system for cryopreservation. Another cryopreservation vessel includes an adaptor mounted to a port of a liquid container. The adaptor includes one tubular branch that is closed by a needle septum while another tubular branch includes a barbed fitting for engaging a flexible tube. The flexible term terminates in a needle septum. The container is initially at below-atmospheric pressure. In use, the liquid sample is injected by needle through the septum in the second branch. Once the container is filled with the sample, the flexible tube is heat sealed and severed just above the barbed fitting. The sealed container may then be subject to a cryopreservation protocol. After thawing, the sample liquid may be withdrawn by a needle puncturing the septum in the first branch.

L'invention concerne un dispositif d'autonucléation qui comprend un tube creux qui contient une matrice de cholestérol cristallin. Les extrémités du tube sont fermées par une membrane imperméable au cholestérol mais perméable au liquide contenu dans un récipient de cryoconservation. Le dispositif d'autonucléation est placé dans le récipient et forme un site de nucléation de la glace pendant la congélation du liquide dans le récipient. Un de ces récipients de cryoconservation est une fiole flexible qui présente à une extrémité adaptée une entrée fermée pour être percée par une aiguille afin de prélever le liquide qui se trouve à l'intérieur. L'extrémité opposée de la fiole est initialement ouverte pour recevoir le liquide. L'extrémité est ensuite scellée pour former un système fermé de cryoconservation. Un autre récipient de cryoconservation comprend un adaptateur monté à une entrée d'un récipient pour liquide. L'adaptateur comprend une branche tubulaire qui est fermée par un septum d'aiguille tandis qu'une autre branche tubulaire comprend une armature cannelée qui s'engage dans un tube flexible. La terminaison flexible se termine dans un septum d'aiguille. Le récipient est initialement à une pression inférieure à la pression atmosphérique. Lors de l'utilisation, l'échantillon liquide est injecté dans la deuxième branche à l'aide d'une aiguille à travers le septum. Une fois que le récipient est rempli d'échantillon, le tube flexible est scellé par chauffage et séparé juste au-dessus de la fixation cannelée. Le récipient scellé peut alors subir un protocole de cryoconservation. Après la décongélation, le liquide de l'échantillon peut être enlevé par une aiguille en perforant le septum au niveau de la première branche.

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