Dry chemistry, lateral flow-reconstituted chromatographic...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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C12Q 1/32 (2006.01) C12N 9/99 (2006.01) C12Q 1/25 (2006.01) C12Q 1/28 (2006.01) C12Q 1/34 (2006.01) C12Q 1/60 (2006.01) G01N 21/00 (2006.01) G01N 31/22 (2006.01)

Patent

CA 2516546

A lateral flow chromatographic assay format for the performance of rapid enzyme-driven assays is described. A combination of components necessary to elicit a specific enzyme reaction, which are either absent from the intended sample or insufficiently present therein to permit completion of the desired reaction, are predeposited as substrate in dry form together with ingredients necessary to produce a desired color upon occurrence of the desired reaction. The strip is equipped with a sample pad placed ahead of the substrate deposit in the flow stream, to which liquid sample is applied. The sample flows from the sample pad into the substrate zone where it immediately reconstitutes the dried ingredients while also intimately mixing with them and reacting with them at the fluid front. The fluid front moves rapidly into the final ~read zone~ wherein the color developed is read against predetermined color standards for the desired reaction. Pretreatment pads for the sample, as needed, (e.g. a lysing pad for lysing red blood cells in whole blood) are placed in front of the sample pad in the flow path as appropriate. The assay in the forma of the invention is faster and easier to perform than analogous wet chemistry assays. Specific assay for glucose-6-phosphate dehydrogenase (~G- 6PD~), total serum cholesterol, .beta.-lactamase activity and peroxidase activity are disclosed

L'invention concerne un format d'analyse par immunochromatographie sur membrane permettant l'exécution d'analyses enzymatiques rapides. Une combinaison de constituants nécessaires pour susciter une réaction enzymatique spécifique, lesquels constituants sont soit absents de l'échantillon cible soit présents dans ce dernier en quantité insuffisante pour permettre l'exécution de la réaction désirée, est prédéposée sur un substrat à l'état sec avec des ingrédients nécessaires pour produire une couleur désirée dès l'apparition de la réaction désirée. La bande est pourvue d'un tampon à échantillon placé en amont du dépôt de substrat dans le flux d'écoulement, tampon sur lequel l'échantillon liquide est appliqué. Cet échantillon s'écoule du tampon à échantillon dans la zone du substrat, où ledit échantillon reconstitue immédiatement les ingrédients secs tout en se mélangeant étroitement à eux et en réagissant avec eux au niveau du front fluidique. Ce front fluidique se déplace rapidement dans la <= zone de lecture >= finale, où la couleur développée est lue par rapport à des normes de couleur prédéterminées pour la réaction désirée. Des tampons de prétraitement pour l'échantillon, si nécessaires, (p. ex. un tampon de lyse pour lyser des globules rouges de sang entier) sont placés devant le tampon à échantillon dans la voie d'écoulement de façon appropriée. Cette analyse dans le format de l'invention est plus rapide et plus simple à exécuter que des analyses chimiques par voie humide analogues. Ladite invention concerne également des analyses spécifiques pour la glucose-6-phosphate déshydrogénase (<= G-6PD >=), le cholestérol sérique total, l'activité .beta.-lactamase et l'activité peroxydase.

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