Methods of isolating nucleic acids using multifunctional...

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N

Patent

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C12N 15/10 (2006.01)

Patent

CA 2575140

The present invention is directed to a method of isolating a target species (e.g., target nucleic acid species) from a mixture. In the methods of the present invention, the mixture is combined with solid phase carriers having a surface comprising multiple functional groups one of which reversibly and selectively binds the target species. In a particular embodiment, the mixture is combined with solid phase carriers having a first functional group which reversibly binds nucleic acids and a second functional group which selectively and reversibly binds the target nucleic acid species, thereby producing a first combination. The first combination is maintained under conditions appropriate for binding of the nucleic acids to the first functional group and binding of the target nucleic acid species to the second functional group. The solid phase carriers are separated from the first combination, and combined with an agent (e.g., buffer) that selectively removes (e.g., elutes) either the nucleic acid from the first functional group or the target nucleic acid species from the second functional group of the solid phase carriers, thereby isolating a target nucleic acid species from a mixture comprising a plurality of nucleic acid species.

L'invention porte sur un procédé d'isolement d'une espèce cible (par exemple une espèce d'acide nucléique cible) à partir d'un mélange. Selon les procédés de l'invention, le mélange est combiné aux supports à phase solide dotés d'une surface comprenant plusieurs groupes fonctionnels dont l'un se lie de manière réversible et sélective à l'espèce cible. Dans un mode de réalisation particulier, le mélange est combiné aux supports à phase solide possédant un premier groupe fonctionnel qui se lie de manière réversible à des acides nucléiques et un second groupe fonctionnel qui se lie de manière sélective et réversible aux acides nucléiques cibles, ce qui permet d'obtenir une première combinaison. La première combinaison est maintenue dans des conditions appropriées à la liaison des acides nucléiques au premier groupe fonctionnel et à la liaison des acides nucléiques cibles au second groupe fonctionnel. Les supports à phase solide sont séparés de la première combinaison, puis combinés à un agent (par exemple un tampon) qui ôte de manière sélective (par exemple élue) soit l'acide nucléique du premier groupe fonctionnel soit les acides nucléiques du second groupe fonctionnel des supports à phase solide, ce qui permet d'isoler des acides nucléiques cibles d'un mélange comprenant une pluralité d'acides nucléiques.

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