Dual function primers for amplifying dna and methods of use

C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q

Patent

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Details

C12Q 1/68 (2006.01) C07H 21/00 (2006.01) C07H 21/04 (2006.01) C12P 19/34 (2006.01)

Patent

CA 2670845

The present invention provides novel nucleotide compositions that enable the detection of DNA synthesis products and methods for use thereof. In one embodiment, the method can be used in PCR and allows the progress of the reaction to be monitored as it occurs. In one embodiment, the invention employs at least one fluorescence-quenched oligonucleotide that can prime DNA extension reactions. In a second embodiment, the invention employs at least one fluorescence-quenched oligonucleotide that can function as a template for DNA extension reactions. In both embodiments, the oligonucleotide also functions as a probe for detecting the progress of successive extension reaction cycles. Signal detection is dependent upon DNA synthesis and can occur with or without probe cleavage.

La présente invention concerne des nouvelles compositions nucléotidiques qui permettent la détection de produits de synthèse d'ADN et des procédés d'utilisation de celles-ci. Dans un mode de réalisation, le procédé peut être utilisé en PCR et permet la progression de la réaction devant être surveillée à mesure qu'elle se produit. Dans un mode de réalisation, l'invention emploie au moins un oligonucléotide à extinction de fluorescence qui peut amorcer les réactions d'extension de l'ADN. Dans un second mode de réalisation, l'invention emploie au moins un oligonucléotide à extinction de fluorescence qui peut servir de matrice pour les réactions d'extension de l'ADN. Dans les deux modes de réalisation, l'oligonucléotide joue également le rôle de sonde pour détecter la progression de cycles successifs de réaction d'extension. La détection du signal est dépendante de la synthèse d'ADN et peut se produire avec ou sans clivage de sonde.

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