C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/09 (2006.01) C12N 1/21 (2006.01) C12N 5/10 (2006.01) C12N 9/00 (2006.01) C12P 21/02 (2006.01)
Patent
CA 2706889
Disclosed is a method for introducing a lysine derivative (particularly an N E -benzyloxycarbonyl-lysine (Z-Lys) derivative) having a useful functional group such as a heavy atom, selenium, a reactive functional group, a fluorescent group or a crosslinker, which is suitable as a non-natural amino acid, into a desired protein in a site-specific manner. Also disclosed is a mutant pyrrolysyl-tRNA shnthetase which has the substitution of at least one amino acid residue selected from a tyrosine residue at position-306, a leucine residue at position-309 and a cysteine residue at position-348 each constituting a pyrrolidin-binding site in the amino acid sequence for pyrrolysyl-tRNA shnthetase depicted in SEQ ID NO:2, wherein the substitution of the amino acid residue is the substitution of a tyrosine residue at position-306 by a glycine or alanine residue, the substitution of a leucine residue at position-309 by a glycine or alanine residue, or the substitution of a cysteine residue at position-348 by a valine, serine or alanine residue.
L'invention concerne un procédé pour introduire un dérivé de lysine (en particulier un dérivé Ne-benzyloxycarbonyl-lysine (Z-Lys)) contenant un groupe fonctionnel tel qu'un atome lourd, un atome de sélénium, un groupe fonctionnel réactif, un groupe fluorescent ou un agent réticulant, approprié comme acide aminé non naturel, dans une protéine désirée de manière spécifique d'un site. L'invention concerne également une pyrrolysyl-ARNt synthétase mutante qui comprend une substitution d'au moins un résidu d'acide aminé choisi parmi un résidu tyrosine en position 306, un résidu leucine en position 309 et un résidu cystéine en position 348, chacun constituant un site de liaison de pyrrolidine dans la séquence d'acides aminés de la pyrrolysyl-ARNt synthétase présentée dans SEQ ID NO:2, la substitution du résidu d'acide aminé étant la substitution d'un résidu tyrosine en position 306 par un résidu glycine ou alanine, la substitution d'un résidu leucine en position 309 par un résidu glycine ou alanine ou la substitution d'un résidu cystéine en position 348 par un résidu valine, sérine ou alanine.
Kobayashi Takatsugu
Sakamoto Kensaku
Yanagisawa Tatsuo
Yokoyama Shigeyuki
Riken
Smart & Biggar
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2071315