C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/071 (2010.01) A61K 35/407 (2006.01) A61K 35/12 (2006.01)
Patent
CA 2424781
A method of obtaining a mixture of cells enriched in hepatic progenitors is developed which comprises methods yielding suspensions of a mixture of cell types, and selecting those cells that are classical MHC class I antigen(s) negative and ICAM-1 antigen positive. The weak or dull expression of nonclassical MHC class I antigen(s) can be used for further enrichment of hepatic progenitors. Furthermore, the progenitors can be selected to have a level of side scatter a measure of granularity or cytoplasmic droplets, that is higher than that in non-parenchymal cells, such as hemopoietic cells, and lower than that in mature parenchymal cells, such as hepatocytes. Furthermore, the progeny of the isolated progenitors can express alpha-fetoprotein and/or albumin and/or CK19. The hepatic progenitors, so isolated, can grow clonally, that is an entire population of progeny can be derived from one cell. The clones of progenitors have a growth pattern in culture of piled-up aggregates or clusters. These methods of isolating the hepatic progenitors are applicable to any vertebrates including human. The hepatic progenitor cell population is expected to be useful for cell therapies, for bioartificial livers, for gene therapies, for vaccine development, and for myriad toxicological, pharmacological, and pharmaceutical programs and investigations.
L'invention concerne un procédé permettant d'obtenir un mélange de cellules enrichies en progéniteurs hépatiques, consistant à obtenir des suspensions d'un mélange de types de cellules, puis à sélectionner les cellules qui sont négatives vis-à-vis du/des antigène(s) CMH de classe I classiques et positives vis-à-vis de l'antigène ICAM-1. L'expression faible ou pratiquement inexistante d'antigène(s) CMH de classe I non-classique(s) peut être utilisée pour enrichir un peu plus les progéniteurs hépatiques. De plus, ces progéniteurs peuvent être choisis de manière à présenter un niveau de dispersion secondaire, une caractéristique de granularité ou de gouttelettes cytoplasmiques, supérieure à celle des cellules parenchymales, telles que les cellules hématopoïétiques, et inférieure à celle des cellules parenchymales adultes, telles que les hépatocytes. En outre, la descendance des progéniteurs isolés peut exprimer l'.alpha.-foetoprotéine et/ou l'albumine et/ou la CK19. Les progéniteurs hépatiques ainsi isolés peuvent être multipliés par clonage, c'est-à-dire qu'une population entière d'une descendance peut être obtenue à partir d'une seule cellule. Les clones des progéniteurs présentent un schéma de croissance en culture sous forme d'agrégats en piles ou de grappes. Ces procédés consistant à isoler les progéniteurs hépatiques peuvent s'appliquer à tout vertébré, y compris à l'être humain. La population de cellules souches hépatiques peut être utilisée dans des cytothérapies, pour des foies bioartificiels, dans des thérapies géniques, pour la mise au point de vaccins, ainsi que dans de nombreux programmes et recherches pharmaceutiques, pharmacologiques et toxicologiques.
Kubota Hiroshi
Reid Lola M.
Mbm Intellectual Property Law Llp
University Of North Carolina At Chapel Hill
LandOfFree
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