C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 15/10 (2006.01) C12Q 1/68 (2006.01)
Patent
CA 2207852
Disclosed is a method for collecting DNA by lysing microbial cells, adsorbing released DNA on a carrier and collecting the DNA adsorbed on the carrier, which method comprises the following steps of (1) lysing the microbial cells in the presence of the carrier so that the DNA obtained by lysing cells is adsorbed onto the carrier, separating solutions used for lysing cells and adsorbing DNA from the carrier, and eluting the DNA adsorbed on the carrier with a solution for eluting DNA and collecting eluted DNA, or (2) feeding microbial cells into, a column comprising the carrier provided on a membrane filter capable of retaining a solution and permeating the solution when aspirated, lysing the microbial cells in the column so that the DNA obtained by lysing cells is adsorbed onto the carrier, separating solutions used for lysing cells and adsorbing DNA in the previous step from the column by aspiration, and feeding a solution for eluting DNA into the column and aspirating to collect the DNA adsorbed on the carrier. The methods of the present invention enable collection of DNA by the chaotropic ion method employing an apparatus with simpler structure and fewer operations.
On dévoile une méthode pour obtenir de l'ADN en provoquant la lyse des cellules microbiennes, en faisant adsorber l'ADN libéré sur un porteur et en recueillant l'ADN adsorbé sur le porteur, laquelle méthode comprend les étapes suivantes : (1) lyser des cellules microbiennes en présence du porteur de manière que l'ADN obtenu par lyse des cellules soit adsorbé sur le porteur, séparer les solutions utilisées pour la lyse des cellules et l'adsorption de l'ADN sur le porteur et éluer l'ADN adsorbé sur le porteur avec une solution pour éluer l'ADN et collecter de l'ADN élué, ou (2) placer les cellules microbiennes dans une colonne comprenant le porteur et pourvue d'une membrane filtrante capable de retenir une solution et de la filtrer par aspiration, entraînant ainsi la lyse des cellules microbiennes dans la colonne de manière que l'ADN obtenu par lyse des cellules soit adsorbé sur le porteur, séparer par aspiration les solutions utilisées pour la lyse des cellules et l'adsorption de l'ADN dans l'étape précédente, et placer une solution pour éluer l'ADN dans la colonne et procéder une aspiration pour recueillir l'ADN adsorbé sur le porteur. Les méthodes découlant de la présente invention permettent la collecte de l'ADN par la méthode ionique chaotrope faisant appel à un appareillage plus simple et à un nombre plus restreint d'opérations.
Dennison Associates
The Institute Of Physical And Chemical Research
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-2084827