C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/02 (2006.01) C12N 5/06 (2006.01)
Patent
CA 2562839
A new cytotoxic T lymphocyte (CTL) assay has been discovered using two cell lines that stably express either green fluorescent protein (GFP) or red fluorescent protein (DsRed), which are distinguishable by FACS, fluorescence microplate reader, or fluorescence microscopy. Using one cell line as a target (T) to present antigen and the other, at the same number, as an internal control (reference, R), a new CTL assay (named fluorolysometric (FL)-CTL assay) way developed based on cytolysis of these fluorescent protein- expressing targets detectable by FACS. This FL-CTL assay was further extended for use with a fluorescent microplate reader. This FL-CTL assay was reproducibly used to determine primary CTL activity at high sensitivity when compared to other conventional assays with in vivo activated T cells against different antigens. This new reliable, sensitive, convenient, and economical CTL assay has broad application potentials for experimental and clinical use in different antigen and effector-target systems.
La présente invention a trait à un dosage lymphocytaire T cytotoxique (CTL) au moyen de deux lignées cellulaires d'expression stable de protéine fluorescente verte (GFP) ou de protéine fluorescente rouge (DsRed) qui sont aptes à être distinguées par un trieur de cellules marqué par fluorescence (FACS), un lecteur pour microplaques par fluorescence, ou la microscopie par fluorescence. En utilisant une lignée cellulaire comme cible (T) pour la présentation de l'antigène et l'autre, au même numéro, comme contrôle interne (R), on a développé un nouveau type de dosage (désigné dosage lymphocytaire T cytotoxique lysométrique par fluorescence, FL-CTL) basée sur la cytolyse de ces cibles d'expression de protéines fluorescentes détectables par trieur de cellules marqué par fluorescence. Ce dosage lymphocytaire T cytotoxique lysométrique par fluorescence a été développé davantage pour être utilisé avec un lecteur pour microplaques par fluorescence. Ce dosage lymphocytaire T cytotoxique lysométrique par fluorescence a été utilisé de manière reproductible pour la détermination de l'activité lymphocytaire T cytotoxique à sensibilité élevée par rapport aux autres dosages classiques avec des lymphocytes T activés in vivo contre différents antigènes. Ce nouveau dosage lymphocytaire T cytotoxique fiable, sensible, simple et économique présente de vastes potentiels d'applications pour une utilisation expérimentale et clinique dans divers systèmes d'antigènes et de cibles effecteurs.
Chen Kong
Cui Yan
Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultu
Mcfadden Fincham
LandOfFree
Method for assessment of cytotoxic t lymphocyte activity does not yet have a rating. At this time, there are no reviews or comments for this patent.
If you have personal experience with Method for assessment of cytotoxic t lymphocyte activity, we encourage you to share that experience with our LandOfFree.com community. Your opinion is very important and Method for assessment of cytotoxic t lymphocyte activity will most certainly appreciate the feedback.
Profile ID: LFCA-PAI-O-2085137