C - Chemistry – Metallurgy – 12 – Q
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
Q
C12Q 1/68 (2006.01) C12N 15/10 (2006.01) G01N 33/50 (2006.01) G01N 33/53 (2006.01) G01N 33/68 (2006.01) C07B 61/00 (2006.01)
Patent
CA 2222879
Biologically active peptides and nucleic acids are identified by a method comprising the following steps: (a) production of a pool of appropriate vectors each containing totally or partly random DNA sequences, (b) efficient transduction of said vectors into a number of identical eukaryotic cells in such a way that a single ribonucleic acid and possibly peptide is expressed or a limited number of different random ribonucleic acids and peptides are expressed by each cell, (c) screening of said transduced cells to see whether some of them have changed a certain phenotypic trait, (d) selection and cloning of said changed cells, (e) isolation and sequencing of the vector DNA in said phenotypically changed cells, and (f) deducing the ribonucleic acid and peptide sequences from the DNA sequence. The peptide sequences may be introduced into or fused to a larger protein preferably an antibody molecule or a fragment thereof. This may be obtained by introducing the random DNA sequences into or fusing them to a DNA sequence encoding such larger protein.
On identifie des peptides et des acides nucléiques biologiquement actifs par un procédé qui comprend les étapes suivantes: (a) fabrication d'un groupe de vecteurs adéquats contenant chacun des séquences d'ADN totalement ou partiellement aléatoires, (b) transduction efficace desdits vecteurs en plusieurs cellules eucaryotes identiques, de manière à ce qu'un seul acide ribonucléique et éventuellement un peptide soient exprimés ou à ce qu'un nombre limité de différents acides ribonucléiques et peptides aléatoires soient exprimés par chaque cellule, (c) criblage des cellules transduites pour vérifier si certaines d'entre elles ont modifié un quelconque trait phénotypique, (d) sélection et clonage de cellules modifiées, (e) isolement et séquençage de l'ADN vecteur dans les cellules modifiées au niveau du phénotype, et (f) déduction des séquences d'acides ribonucléiques et de peptides de la séquence d'ADN. On peut fusionner ou introduire les séquences peptidiques dans une protéine plus importante, de préférence une molécule d'anticorps ou un de ses fragments. On réalise cette opération en introduisant ou en fusionnant les séquences d'ADN aléatoires dans une séquence d'ADN codant cette protéine plus importante.
Dalum Iben
Duch Mogens
Hindersson Peter
Jensen Martin Roland
Lund Anders Henrik
Inoxell A/s
M. & E. Biotech A/s
Ogilvy Renault Llp/s.e.n.c.r.l.,s.r.l.
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1547744