C - Chemistry – Metallurgy – 12 – N
Patent
C - Chemistry, Metallurgy
12
N
C12N 5/10 (2006.01) C12Q 1/66 (2006.01) G01N 33/566 (2006.01) G01N 33/74 (2006.01)
Patent
CA 2419977
The present invention concerns a method for determining the androgenic activity of a sample, comprising the steps of a) contacting the sample with a cell comprising a luciferase reporter plasmid,a fusion protein comprising a ligand-binding domain of the androgen receptor and a Gal4 DNA-binding domain, said fusion protein being able to bind to binding sites in said luciferase reporter plasmid, a fusion protein comprising an N-terminal region of the androgen receptor and a protein being able to bind to the luciferase gene promoter, and an androgen receptor-interacting protein 3, b) allowing the sample to incubate with said cell, c) lysing said cell, d) measuring the luciferase activity of the lysate, e) comparing the measured luciferase activity to that obtained by repeating the steps a) to d) above except that a control is added instead of the sample, to give the relative luciferase activity of the sample, and f) using the relative luciferase activity to detect or quantify an active androgen in the sample.
L'invention concerne un procédé servant à déterminer l'activité androgénique d'un échantillon, consistant: a) à mettre en contact l'échantillon avec la cellule comprenant un plasmide rapporteur de luciférase, une protéine hybride comprenant un domaine de liaison aux ligands du récepteur d'androgène et un domaine de liaison Gal4 ADN, ladite protéine hybride pouvant se fixer aux sites de liaison dans ledit plasmide rapporteur de luciférase, une protéine hybride comprenant une région N-terminale du récepteur d'androgène et une protéine pouvant fixer le promoteur de gène de luciférase, et une protéine 3 interagissant avec le récepteur d'androgène, b) à permettre à l'échantillon d'incuber avec ladite cellule, c) à lyser cette cellule, d) à mesurer l'activité de luciférase du lysat, e) à comparer l'activité de luciférase mesurée avec celle obtenue, par répétition des étapes a) et d) ci-dessus, un témoin étant ajouté à la place de l'échantillon, pour donner l'activité relative de luciférase de l'échantillon, et f) à utiliser l'activité relative de luciférase pour détecter ou quantifier un androgène actif dans l'échantillon.
Janne Olli A.
Palvimo Jorma J.
Raivio Taneli
Hormos Medical Corporation
Robic
LandOfFree
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Profile ID: LFCA-PAI-O-1675723